1.一種特異性萊克多巴胺人工抗原的合成方法,其特征在于以章魚胺和乙酰丙酸乙酯為原料合成萊克多巴胺半抗原即化合物I,化合物I通過1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺EDC與N-羥基琥珀酰亞胺NHS活化、或者通過三正丁胺與氯甲酸異丁酯活化,再與載體蛋白進(jìn)行偶聯(lián)制得萊克多巴胺人工抗原即化合物Ⅱ;步驟為:(1)萊克多巴胺半抗原的制備:將章魚胺和乙酰丙酸乙酯按摩爾比1:1混合,在甲醇溶液中,每1mmol章魚胺用0.5?mL三乙胺催化下,室溫條件下,通過氰基硼氫化鈉還原,每1mmol章魚胺用1.1mmol氰基硼氫化鈉還原反應(yīng)12h得到中間產(chǎn)物;將中間產(chǎn)物在堿性條件水解,得到含活性羧基的分子,作為萊克多巴胺半抗原,即化合物I;化合物I的結(jié)構(gòu)式如式I所示:
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式I;(2)萊克多巴胺人工抗原的制備:(A)將化合物I用N,N-二甲基甲酰胺DMF溶解,化合物I與N-羥基琥珀酰亞胺NHS,1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺EDC的摩爾比為1:?1.5:?2,在4℃避光攪拌反應(yīng)1h,再在室溫反應(yīng)12h,得活化的萊克多巴胺半抗原溶液;取牛血清白蛋白,化合物I與牛血清白蛋白的摩爾比為80:1,將牛血清白蛋白用0.1M?pH9.6?碳酸鹽緩沖液溶解,其中溶解后的牛血清白蛋白濃度大于3mg/mL,且碳酸鹽緩沖液與N,N-二甲基甲酰胺DMF的體積比例為5:1;將活化的萊克多巴胺半抗原溶液慢速滴加到牛血清白蛋白溶液中,室溫下反應(yīng)24h,用PBS緩沖液透析2天,期間更換PBS緩沖液4次,即得到萊克多巴胺人工抗原,即化合物Ⅱ;化合物Ⅱ的結(jié)構(gòu)式如式Ⅱ所示:
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式Ⅱ;或(B)將化合物I用N,N-二甲基甲酰胺DMF溶解,化合物I與三正丁胺,氯甲酸異丁酯的摩爾比為1:?1.2:?1.2,?0℃反應(yīng)1h,得活化的萊克多巴胺半抗原溶液;取牛血清白蛋白,化合物I與牛血清白蛋白的摩爾比為80:1,將牛血清白蛋白用?0.1M?pH9.6?碳酸鹽緩沖液溶解,0℃預(yù)冷30min,其中溶解后的牛血清白蛋白濃度大于3mg/mL,且碳酸鹽緩沖液與N,N-二甲基甲酰胺(DMF)的體積比例為5:1;在0℃條件下,將活化的萊克多巴胺半抗原溶液慢速滴加到牛血清白蛋白溶液中,0℃條件下反應(yīng)1h,然后室溫反應(yīng)24h,用PBS緩沖液透析2天,期間更換PBS緩沖液4次,即得到萊克多巴胺人工抗原,即化合物Ⅱ。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述萊克多巴胺人工抗原的合成方法,其特征在于:所述的載體蛋白牛血清白蛋白BSA被替換為匙孔血藍(lán)蛋白KLH、血藍(lán)蛋白LPH、雞卵清白蛋白OVA、人血清白蛋白HSA之一種。3.用權(quán)利要求1所述方法合成的萊克多巴胺人工抗原的應(yīng)用,其特征在于制備萊克多巴胺抗體,所述抗體為多克隆抗體和/或單克隆抗體。4.用權(quán)利要求1所述方法合成的萊克多巴胺人工抗原的應(yīng)用,其特征在于檢測(cè)食品中萊克多巴胺殘留。