1.包含下述核酸的腺相關病毒載體在制備用于治療有心力衰竭
受試者的藥物中的應用,所述核酸編碼由SEQ?ID?NO:2的1-65位氨基酸
組成且位置35為天冬氨酸或谷氨酸的人磷酸酶抑制劑-1組成型活性片
段,所述的片段能夠組成型抑制磷酸酶的活性,從而改善有心力衰竭
的受試者心臟收縮以及使其免受與心臟重塑相關的形態退化,所述的
腺相關病毒載體用于在體內直接導入受試者的心臟細胞。
2.權利要求1的應用,其中所述的磷酸酶抑制劑-1蛋白抑制1型磷
酸酶。
3.權利要求1或2的應用,其中所述的磷酸酶抑制劑-1蛋白在位置
35具有天冬氨酸。
4.權利要求1或2的應用,其中所述的核酸由所述的編碼序列和與
之可操作連接的啟動子組成。
5.權利要求4的應用,其中所述的啟動子是組成型啟動子。
6.權利要求4的應用,其中所述的啟動子在組織的子集中表達,且
其中至少一種是心肌。
7.權利要求4的應用,其中所述的啟動子是巨細胞病毒啟動子或來
自心臟特異性基因心臟肌鈣蛋白T、肌球蛋白重鏈或肌球蛋白輕鏈的啟
動子。
8.權利要求1的應用,其中所述的腺相關病毒載體是血清型1,血
清型2,血清型3,血清型4,血清型5,血清型6,血清型7,血清型8或
血清型9的腺相關病毒載體。
9.權利要求1的應用,其中收縮的增加是通過提高的肌細胞收縮
(肌細胞長度改變)、提高的肌細胞收縮(-dL/dt)和再次伸長(+dL/dt)
的速率、降低的松弛的時間常數tau和加速鈣信號衰減來確定的。
10.權利要求1的應用,其中,所述腺相關病毒載體用于以有效提
高受磷蛋白的絲氨酸16的磷酸化的量來引入。
11.權利要求1的應用,其中,免受與心臟重塑相關的形態退化是
通過檢測心臟對體重的比例、梗塞面積、和存在心臟纖維化來確定的,
其中如果與對照相比,所述人磷酸酶抑制劑-1導致降低的心臟對身體的
重量比、降低的梗塞面積或降低的心臟纖維化,那么保護就存在。
12.權利要求1的應用,其中所述的心力衰竭由缺血、心律不齊、
心肌梗塞、異常的心臟收縮性或異常的Ca2+代謝引起。
13.權利要求1的應用,其中受試者是人。
14.權利要求1的應用,其中限制通過冠狀血管的血流,所述腺相
關病毒載體用于引入冠狀動脈的腔內。
15.權利要求14的應用,其中,在限制冠狀靜脈流出的同時允許心
臟跳動。
16.權利要求14的應用,其中完全限制通過冠狀血管的血流。
17.權利要求14的應用,其中受限制的冠狀血管包括:左前降動脈、
冠狀動脈、遠端回旋支動脈、大冠狀靜脈、心中靜脈或前心室內靜脈。
18.權利要求14的應用,其中在冠狀血管缺血預處理后進行腺相關
病毒載體的引入。
19.權利要求1的應用,其中在限制血液流出心臟的動脈流時將腺
相關病毒載體注射至心臟中,由此允許所述載體注入并遞送至心臟。
20.權利要求1的應用,其中,所述腺相關病毒載體用于通過包括
以下步驟的方法注射至心臟中:
限制血液流出心臟的主動脈流,使得血流改變方向至冠狀動脈中;
將載體注射至心臟、主動脈或冠狀口的腔內,使得載體流入冠狀
動脈中;
在限制血液的主動脈流出的同時允許心臟跳動;和
恢復血液的流動。
21.權利要求1的應用,其中所述載體用于用導管將其注射至心臟
中。
22.權利要求1的應用,其中所述載體用于將其直接注射至心肌中。
23.權利要求1的應用,所述方法還包括評價受試者心臟功能的參
數。
24.權利要求23的應用,其中心臟功能的參數是以下的一種或多
種:心率、心臟代謝、心臟收縮性、心室功能、Ca2+代謝或肌漿網
Ca2+ATPase活性。
25.腺相關病毒載體,其包含編碼下述人磷酸酶抑制劑-1組成型活
性片段的核酸,所述的人磷酸酶抑制劑-1組成型活性片段包含SEQ?ID?
NO:2的1-65位氨基酸且位置35為天冬氨酸或谷氨酸,其在心肌細胞中
組成型抑制磷酸酶活性。
26.制備包括調節磷酸酶活性的核酸的病毒顆粒的方法,該方法包
括:
將包含權利要求25的病毒載體的宿主細胞接觸一種或多種提供能
夠提供顆粒形成所需要病毒基因產物的成分的試劑,所述病毒載體可
操作地連接病毒包裝信號,和
從宿主細胞周圍的介質中收集包裝了核酸但不含有可復制病毒的
病毒顆粒。
27.權利要求26的方法,其中所述一種或多種試劑由輔助病毒組
成。
28.權利要求25的病毒載體,其中所述的腺相關病毒是血清型1,
血清型2,血清型3,血清型4,血清型5,血清型6,血清型7,血清型8
或血清型9的腺相關病毒。
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