本發(fā)明涉及一種分離輔酶Q10的制備方法，特別涉及一種高純度輔酶Q10的規(guī)模化制備方法。所述方法包括將含有輔酶Q10的干燥菌體經(jīng)超臨界萃取得到萃取液，萃取液經(jīng)堿處理得到上柱液，上柱液上柱層析，得到洗脫液，洗脫液濃縮，用乙醇結(jié)晶得到大于99.5%的高純度輔酶Q10。通過此種方法生產(chǎn)輔酶Q10，總收率大于90%，成本低廉，適于工業(yè)化生產(chǎn)。

1.?一種高純度輔酶Q10的規(guī)模化制備方法，其特征在于包括以下步驟：（1）發(fā)酵液處理：將含有輔酶Q10的發(fā)酵液分離得到濕菌體，烘干所得濕菌體得干燥菌體，所得干燥菌體經(jīng)二氧化碳超臨界萃取得到含有輔酶Q10的萃取液；（2）萃取液處理：將所得萃取液通過濃度為0.2～0.5mol/L的氫氧化鈉溶液處理得到上柱液；（3）上柱液處理：將所得上柱液通過粒徑為200～300目的硅膠柱層析，再用醚、烷、醇、酮、酯中的一種或兩種溶劑作為洗脫劑進(jìn)行洗脫得到洗脫液；所用的洗脫劑選自含1～5%（V/V）乙醇的石油醚溶液、含1～5%（V/V）乙醇的正己烷溶液、含1.5～4%（V/V）乙酸乙酯的石油醚溶液、含1.5～4%（V/V）乙酸乙酯的正己烷溶液、含1.5～4.5%（V/V）丙酮的石油醚溶液、含1.5～5%（V/V）乙醇的環(huán)己烷溶液、含1.5～3%（V/V）異丙醚的環(huán)己烷溶液中的一種或多種；（4）洗脫液處理：將所得洗脫液濃縮并冷卻得第一晶體，在所得第一晶體中加乙醇溶解，然后用微孔濾膜過濾后得到濾液，將所得濾液降溫攪拌結(jié)晶后再離心分離，得到潮濕的第二晶體，再將所得第二晶體干燥、粉碎，得到純度大于99.5%的輔酶Q10。2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高純度輔酶Q10的規(guī)模化制備方法，其特征在于：所述步驟（1）中干燥菌體的粒度為40～200目，含水量為5～15%，輔酶Q10的含量為10～40mg/g。3.?根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種高純度輔酶Q10的規(guī)模化制備方法，其特征在于：所述步驟（1）中二氧化碳超臨界萃取所用的夾帶溶劑為醇、酮、醚、酯、烷中的至少一種。4.?根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種高純度輔酶Q10的規(guī)模化制備方法，其特征在于：所述二氧化碳超臨界萃取的萃取條件為：壓力24.5MPa，溫度35℃，夾帶劑用量1.2ml/g，萃取時間45min。5.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高純度輔酶Q10的規(guī)模化制備方法，其特征在于：所述步驟（2）包括如下步驟：（a）將所得萃取液與0.2～0.5mol/L的氫氧化鈉溶液混合，機械攪拌30～50min；（b）靜置分層2～3h，分取其中的有機相作為第一有機相；（c）將所述第一有機相與水混合，機械攪拌5～15min，所用水的體積為所述萃取液體積的0.5～1倍；（d）靜置分層20～30min，分取其中的有機相作為第二有機相；（e）將所述第二有機相經(jīng)脫水處理，得到上柱液。6.?根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種高純度輔酶Q10的規(guī)模化制備方法，其特征在于：所述步驟（e）所述的脫水處理是使用氯化鈣、無水硫酸鈉中的至少一種為干燥劑，每升所述第二有機相的干燥劑用量為0.01～0.03千克。7.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高純度輔酶Q10的規(guī)模化制備方法，其特征在于：所述步驟（3）中硅膠填料的重量是輔酶Q10?重量的5～10倍。