本發(fā)明涉及一種以精氨酸為原料制備L?鳥氨酸的方法，步驟為：(1)底物的獲得：將精氨酸陶瓷膜過(guò)濾液經(jīng)711氨型樹脂吸附，用2.0N氨水洗脫，得到精氨酸陽(yáng)柱純化液；(2)將含有精氨酸酶的菌體,用生理鹽水洗滌1次,離心后收集菌體。將菌體轉(zhuǎn)移到轉(zhuǎn)化液中，轉(zhuǎn)化液包括0.3mol/L碳酸鹽緩沖液(NaCO與NaHCO體積比為7:3)和0.1mg/ml的Mn，加入5％的L?精氨酸純化液,反應(yīng)24h(30℃，200r/min)；轉(zhuǎn)化率可達(dá)98％。本發(fā)明以精氨酸為原料制備L?鳥氨酸，產(chǎn)品純度高，易分離，產(chǎn)成品成本低。

1.一種以精氨酸為原料制備L-鳥氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
（1）底物的獲得：將精氨酸陶瓷膜過(guò)濾液經(jīng)711氨型樹脂吸附，用2.0N氨水洗脫，得到精
氨酸陽(yáng)柱純化液；
（2）轉(zhuǎn)化培養(yǎng)：將含有精氨酸酶的菌體，用生理鹽水洗滌1次，離心后收集菌體，將菌體
轉(zhuǎn)移到轉(zhuǎn)化液中，轉(zhuǎn)化液包括0.3mol/L碳酸鹽緩沖液和0.1mg/ml的Mn²⁺，加入5%的L-精氨酸
純化液， 30℃，200r/min條件下反應(yīng)24h；即可獲得L-鳥氨酸；
所述步驟（2）中含有精氨酸酶的菌體的制備方法如下：
① 斜面培養(yǎng)：將菌株MQO-154在無(wú)菌條件下接種到斜面培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度
為33℃，培養(yǎng)時(shí)間為24h；
斜面培養(yǎng)基：葡萄糖25g，魚蛋白胨15g，KH₂P0₄ 0.6g，MgS0₄?7H₂0 0.5g，K₂HP0₄ 1.5g，瓊
脂16g，加純凈水至1L，用NaOH調(diào)pH至為7.0，滅菌溫度115℃，15分鐘；
② 種子擴(kuò)大培養(yǎng)：從步驟①的斜面培養(yǎng)基上挑取菌落，加水稀釋獲得菌體溶液，稀釋
后的濃度為3×10⁵-5×10⁵個(gè)/mL，將菌體溶液接種到種子培養(yǎng)基上進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，接種量為
10%，v/v，擴(kuò)大培養(yǎng)的溫度為30℃，培養(yǎng)時(shí)間為24h，0-10h，搖床轉(zhuǎn)速100r/min，10-20h，搖床
轉(zhuǎn)速120r/min，20-24h，搖床轉(zhuǎn)速100r/min；
種子培養(yǎng)基：葡萄糖25g，乙酸銨9g，KH₂P0₄0.59g，K₂HP0₄ 1.5g，MgS0₄?7H₂0 O.5g，硫酸
亞鐵0.05g，鐵硫酸錳0.05g，VB₁HCl 0.005g，瓊脂16g，加純凈水至1L，用NaOH調(diào)pH至7.0，滅
菌溫度115℃，15分鐘；
③ 發(fā)酵培養(yǎng)：將擴(kuò)大培養(yǎng)后的菌體接種到發(fā)酵液體培養(yǎng)基中，接種量為10%，v/v，接種
時(shí)菌體溶液的濃度為3×10⁵-5×10⁵個(gè)/mL，于30℃，170r/min的搖床上發(fā)酵24h，得到含精氨
酸酶的發(fā)酵培養(yǎng)液；
發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖25g，魚蛋白胨15g，玉米漿10g，酵母膏1g，KH₂P0₄ 0.5g，MgS0₄·7H₂O
0.5g，F(xiàn)eSO₄ 0.05g，MnSO₄ 0.05g，VB₁HCl 0.005g，用自來(lái)水配成1L溶液，用NaOH調(diào)pH至7.0，
滅菌溫度121℃，滅菌時(shí)間20分鐘；
④ 30L發(fā)酵罐培養(yǎng)：將步驟③中發(fā)酵培養(yǎng)后的發(fā)酵液接種到30L發(fā)酵罐的培養(yǎng)基中，接
種量為10%，v/v，接種時(shí)菌體溶液的濃度為3×10⁵-5×10⁵個(gè)/mL，控制罐壓強(qiáng)為0.05MPa，在
33℃條件下培養(yǎng)28小時(shí)，攪拌轉(zhuǎn)速為600-800rpm，風(fēng)量為1：0.8，控制溶氧量為30-40%，全程
用無(wú)菌飽和氨水控制pH為6.7-7.0，中途補(bǔ)糖控制殘?zhí)菫?%，放罐殘?zhí)菫?%，發(fā)酵后得含有
精氨酸酶的菌體；
所述步驟①中所述斜面培養(yǎng)基的組成為：
葡萄糖25g，魚蛋白胨15g，KH₂PO₄ 0.6g，MgSO₄?7H₂0 0.5g，K₂HPO₄ 1.5g，瓊脂16g，加純
凈水至1L；斜面培養(yǎng)基用NaOH調(diào)pH至為7.0，滅菌溫度115℃，15min；
所述步驟②中所述種子培養(yǎng)基的組成為：
葡萄糖25g，乙酸銨9g，KH₂P0₄ 0.59g，K₂HPO₄ 1.5g，MgSO₄?7H₂0 0.5g，F(xiàn)eSO₄ 0.05g，
MnSO₄ 0.05g，VB₁HCl 0.005g，瓊脂16g，加純凈水至1L，用NaOH調(diào)pH至7.0，滅菌溫度115℃，
15min；
所述步驟③中所述發(fā)酵培養(yǎng)基的組成為：
葡萄糖25g，魚蛋白胨15g，玉米漿10g，酵母膏1g，KH₂PO₄ 0.5g，MgSO₄?7H₂O 0.5g，F(xiàn)eSO₄
0.05g，MnSO₄ 0.05g，VB₁HCl 0.005g，用自來(lái)水配成1L溶液，用NaOH調(diào)pH至7.0，滅菌溫度121
℃，滅菌時(shí)間20min；發(fā)酵培養(yǎng)基用NaOH調(diào)pH至7.0，滅菌溫度121℃，滅菌時(shí)間20min；
所述菌株MQO-154的保藏編號(hào)為：CGMCC No.10728；保藏單位為：中國(guó)微生物菌種保藏
管理委員會(huì)普通微生物中心；保藏日期為：2015年4月21日；保藏地址為：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰
西路1號(hào)院3號(hào)。