1.一種制備具有N-末端識別位點His-Gly的生物活性Exendin-4的方
法，所述Exendin-4具有促胰島素活性，所述方法包括下列步驟：
a)以編碼Exendin-4前體的多核苷酸載體轉化經遺傳修飾的畢赤酵母，
所述Exendin-4前體為具有C-末端甘氨酸的Exendin-4，所述畢赤酵母的蛋
白酶基因STE13已被敲除；
b)培養所述轉化的畢赤酵母以生產Exendin-4前體；和
c)分離并α-酰胺化所述Exendin-4前體以生產所述生物活性
Exendin-4。
2.如權利要求1所述的方法，其中所述Exendin-4前體是與C-末端α-
酰胺化酶接觸從而產生α-酰胺化的生物活性Exendin-4。
3.如權利要求2所述的方法，其中所述α-酰胺化的Exendin-4如SEQ?ID?
NO.2所示：
HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH2。
4.一種制備具有N-末端識別位點His-Gly的Exendin-4前體的方法，
所述Exendin-4前體為具有C-末端甘氨酸的Exendin-4，該Exendin-4前體
具有促胰島素活性，所述方法包括下列步驟：
a.以編碼所述Exendin-4前體的多核苷酸載體轉化經遺傳修飾的畢赤
酵母，所述畢赤酵母的蛋白酶基因STE13已被敲除；和
b.培養所述轉化的畢赤酵母以生產所述Exendin-4前體。
5.如權利要求1或4所述的方法，其中所述Exendin-4前體的氨基酸
序列如SEQ?ID?NO.4所示。
6.如權利要求5所述的方法，其中編碼所述Exendin-4前體的多核苷
酸序列如SEQ?ID?NO.5所示。
7.如權利要求1或4所述的方法，其中所述蛋白酶基因STE13為N-
末端二肽酰肽酶基因。
8.如權利要求1或4所述的方法，其中所述轉化的畢赤酵母在誘導
Exendin-4前體表達的條件下培養。
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