本發明涉及一種葡萄糖脫氫酶突變體的篩選方法，屬于突變體篩選技術領域。本發明的篩選方法包括以下步驟：對葡萄糖脫氫酶基因進行隨機突變，得到葡萄糖脫氫酶的突變文庫；將所述突變文庫中的基因構建到pET28a?INP質粒上，得到pET28a?INP?GDH質粒，將所述pET28a?INP?GDH質粒轉化入大腸桿菌中，得到基于冰核蛋白的細菌表面展示系統菌株；將所述基于冰核蛋白的細菌表面展示系統菌株涂布到藍白斑篩選培養基上，篩選顏色為白色的菌落為葡萄糖脫氫酶突變菌株。本發明提供的篩選方法簡單、快捷、實用，可以極大節省葡萄糖脫氫酶突變體的篩選時間。

1.一種葡萄糖脫氫酶突變體的篩選方法，包括以下步驟：對葡萄糖脫氫酶基因進行隨機突變，得到葡萄糖脫氫酶的突變文庫；將所述突變文庫中的基因構建到pET28a-INP質粒上，得到pET28a-INP-GDH質粒，將所述pET28a-INP-GDH質粒轉化入大腸桿菌中，得到基于冰核蛋白的細菌表面展示系統菌株；將所述基于冰核蛋白的細菌表面展示系統菌株涂布到藍白斑篩選培養基上，篩選顏色為白色的菌落為葡萄糖脫氫酶突變菌株；所述藍白斑篩選培養基以自誘導培養基為基礎，包括0.05～0.15g/L氧化型染料，1mM單糖類底物，0.05mM輔酶NAD⁺或NADP⁺，0.05mM卡那霉素，0.05mM N-甲基吩嗪甲基硫酸鹽；所述氧化型染料包括亞甲基藍、甲苯胺藍、中性紅、亮甲酚藍或氮藍四唑；所述單糖類底物包括葡萄糖、木糖、果糖、阿拉伯糖、半乳糖；所述自誘導培養基包括5～10g/L甘油，2～4g/L乳糖，10～15g/L瓊脂糖，10～15g/L蛋白水解產物N-Z-Amine AS，0.1～0.5g/L酵母粉，0.5～1.5g/L NaCl，2～5mM MgSO₄，25～40mM Na₂HPO₄，25～40mM KH₂PO₄，50～80mM NH₄Cl，5～8mM Na₂SO₄和體積分數為0.1％的復合微量元素；所述復合微量元素包括50～80μM的Fe³⁺，20～50μM的Ca²⁺，10～30μM的Mn²⁺，10～30μM的Zn²⁺，2～5μM的Co²⁺，2～5μM的Cu²⁺，2～5μM的Ni²⁺，2～5μM的MoO₄^2-，2～5μM的SeO₃^2-和2～5μM的BO₃^3-。2.根據權利要求1所述的篩選方法，其特征在于，所述隨機突變采用的方法為易錯-PcR。