本發(fā)明提供磁性交聯(lián)酶聚集體催化合成苯丙烯基β?D?葡萄糖苷的方法，屬于生物催化領(lǐng)域，利用底物苯丙烯醇與D?葡萄糖在酶的作用下糖基化合成苯丙烯基β?D?葡萄糖苷，反應(yīng)體系為非水相體系。利用磁性交聯(lián)β?葡萄糖苷酶聚集體催化糖基化合成苯丙烯基β?D?葡萄糖苷的報(bào)道還未有所見(jiàn)，本發(fā)明具有獨(dú)特新穎的自主創(chuàng)新性，在非水相體系中，能保證酶的活力與穩(wěn)定性，以及使熱力學(xué)平衡朝逆水解反應(yīng)方向進(jìn)行。該體系簡(jiǎn)單，可一步直接合成苯丙烯基β?D?葡萄糖苷，產(chǎn)物易分離純化，純度高。本反應(yīng)所選用的底物均為廉價(jià)的化工原料，與從紅景天屬植物中提取苯丙烯基β?D?葡萄糖苷的傳統(tǒng)方法比，大大節(jié)約了成本，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。

1.磁性交聯(lián)酶聚集體催化合成苯丙烯基β-D-葡萄糖苷的方法，其特征在于：此方法是
利用底物苯丙烯醇與D-葡萄糖在酶的作用下于非水相體系即有機(jī)溶劑-緩沖溶液體系中合
成苯丙烯基β-D-葡萄糖苷，反應(yīng)在特定的條件下進(jìn)行；
所述的有機(jī)溶劑采用乙腈、1,4-二氧六環(huán)、丙酮中的任意一種；
所述的有機(jī)溶劑的體積含量為60~95%；
所述緩沖液為0.1 M的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖溶液，pH范圍為4~7；
所述反應(yīng)的苯丙烯醇濃度為20~300g/L，D-葡萄糖濃度為50~150g/L；
所述磁性交聯(lián)酶聚集體的制備方法為：
（1）將1.351 g FeCl₃、0.685 g FeSO₄?7H₂O及25 mL的去離子水室溫下混勻，加氨水至
沉淀不增加，多次離心后用去離子水洗滌至pH值為7.0，90 ℃烘干2 h得到未硅烷化的磁性
鐵氧化物顆粒；取上述烘干后未硅烷化的磁性鐵氧化物顆粒0.02 g，加入2.5 mL甲醇、100
μL 3-氨丙基三乙氧基硅烷、25 μL去離子水，混合均勻后超聲30 min，再加入1.5 mL甘油，
90 ℃下劇烈振蕩6 h，將混合液離心處理后經(jīng)100 ℃烘干即得穩(wěn)定硅烷化后的磁性鐵氧化
物粒子；
（2）5 mL帶塞離心管中加入1 mL以pH 5.0的檸檬酸-磷酸緩沖溶液配制的2 mg/mL β-
葡萄糖苷酶酶液和一定量的磁性鐵氧化物顆粒，以有機(jī)溶劑作沉降劑，混勻后于6 ℃、200
r/min下振蕩10 min；后加入交聯(lián)劑戊二醛使其在反應(yīng)體系中達(dá)到不同濃度，于6 ℃、200
r/min繼續(xù)振蕩一定時(shí)間后以磁鐵吸附固定化酶，棄上清液，固形物用去離子水洗滌數(shù)次后
得到磁性交聯(lián)酶聚集體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述磁性交聯(lián)酶聚集體催化合成苯丙烯基
β-D-葡萄糖苷的反應(yīng)在恒溫振蕩培養(yǎng)箱中進(jìn)行，反應(yīng)的轉(zhuǎn)速為150~300rpm，所述反應(yīng)的溫
度為40~60℃。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述磁性交聯(lián)酶聚集體催化合成苯丙烯基
β-D-葡萄糖苷的反應(yīng)的時(shí)間進(jìn)程為24~144h。