本發明涉及一種利用鏈格孢屬微生物胞內酶轉化葡萄糖生成白藜蘆醇的方法。白藜蘆醇的生產主要依賴于從植物中直接提取，其中能夠廣泛用于生產的主要植物是中藥材野生虎杖的根莖，嚴重地限制了該產業的發展。本發明將鏈格孢屬CCTCCNo:M2011348菌株接種于液體培養基中培養后，過濾收集菌絲體，洗凈研磨破碎，加入粗酶提取液，離心后收集上清液，加入固體硫酸銨，靜置過夜后離心收集沉淀得粗酶液；取緩沖液，加入粗酶液，反應得到白藜蘆醇。本發明利用鏈格孢屬微生物的胞內酶為催化劑，以葡萄糖為底物，在溫和的反應體系轉化合成白藜蘆醇，安全環保，生產效率高，可控性強，生產成本低，適合大規模工業生產。

1.利用鏈格孢屬微生物胞內酶轉化葡萄糖生成白藜蘆醇的方法，其特征在于：由以下步驟實現：步驟一：酶液的制備：（1）將鏈格孢屬CCTCC?No:?M2011348菌株接種于液體培養基中，在28℃、120?rpm的條件下培養4天；所述液體培養基為土豆汁葡萄糖液體培養基，配方為：?20%的馬鈴薯浸汁1000mL，葡萄糖20?g；（2）取培養物用過濾法收集菌絲體，并用蒸餾水沖洗干凈；（3）將所得菌絲體在液氮中研磨破碎，按每4.0?g?菌絲體加入8?ml粗酶提取液的比例加入粗酶提取液，混合均勻后，在溫度4℃、轉速1000rpm的條件下離心10min，收集上清液；所述粗酶提取液為磷酸鹽緩沖溶液，摩爾濃度為50mmol/L，?pH為7，其中含有0.1g/L硫酸鎂、0.2g/L硫酸鈣、0.6mmol/L?DTT；（4）在上清液中加入固體硫酸銨至其飽和濃度為75%，4℃靜置過夜后在1000rpm轉速下離心10?min，收集沉淀并用（3）中的粗酶提取液溶解后放入透析袋中，在4℃透析至無SO₄^2－檢出為至，透析袋中所得液體即為粗酶液；步驟二：生成白藜蘆醇：取100?mL緩沖液，加入步驟一得到的粗酶液5-50?mL，在溫度37℃、轉速120?rpm的條件下反應0.5～4?h，反應體系中分別加入0.2?mg/100?mL的丙二酰輔酶A、ATP、輔酶A、對-香豆酸或苯丙氨酸，得到白藜蘆醇；所述緩沖液為含有0.1?g/L硫酸鎂、0.2?g/L硫酸鈣和0.5-10.0?mmol/L葡萄糖的50?mmol/L的磷酸緩沖溶液、0.1mol/L檸檬酸緩沖溶液或50?mmol/L?Tris-HCl緩沖溶液，pH為3-7.5。2.根據權利要求1所述的利用鏈格孢屬微生物胞內酶轉化葡萄糖生成白藜蘆醇的方法，其特征在于：步驟一中，得到的粗酶液制備成固定化酶，具體步驟為：在200mL燒杯中加入2g海藻酸鈉和50ml蒸餾水，加熱攪拌，使其完全混合，待冷卻后，加入10mL步驟一得到的粗酶液混合，用注射器滴入1%氯化鈣溶液中，放置在4℃環境中固定化1?h后，用蒸餾水清洗數遍放置于4℃蒸餾水中保存備用。