1.黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法,其特征在于包括以下步驟:1)原料的處理:取黃秋葵嫩果,以橫段面切片后曬干或風干,備用;2)滲漉提取:將干燥的片狀黃秋葵果實裝入滲漉筒中,用折合黃秋葵干燥果實1~2倍量的40%~70%含水乙醇浸潤4~6小時后裝入滲漉桶中,用折合黃秋葵干燥果實10~18倍量的50%~70%含水乙醇進行滲漉提取,調節(jié)流速,以8~15?mL/min流速收集滲漉提取液;3)閃蒸濃縮:將滲漉提取液在水浴溫度60~70℃,真空度為0.090?Mpa~0.095?Mpa的條件下采用真空薄膜濃縮裝置進行閃蒸濃縮,調節(jié)待濃縮液的進液速度,以150~350?mL?·?min
-1的流量反復濃縮,得到折合每毫升濃縮液含0.5~1.0克原藥材的濃縮液;4)脫色除雜處理:將濃縮液用石油醚萃取脫色除雜3~4次,每次用量為濃縮液與石油醚的體積比為1:1~1:3,將石油醚萃取液合并后進行真空濃縮,回收石油醚,萃取脫色后得到的濃縮液備用;5)醇沉轉移出多糖與果膠:在上述濃縮液中加入95%的工業(yè)酒精調整至濃縮液中乙醇濃度達到70%~80%,放置過夜,析出多糖與果膠沉淀,將沉淀物轉移出去另行利用,得到除糖后的濃縮液;6)繼續(xù)真空濃縮:得到除糖后的濃縮液繼續(xù)在50℃以下真空閃蒸濃縮,得到折合每毫升濃縮液含1.5~2.0克原藥材的濃縮液;7)大孔樹脂分離富集:得到的濃縮液通過Diaion?HP-20大孔吸附樹脂柱色譜分離富集,然后先用H
2O洗脫,再依次用10%~70%含水甲醇或含水乙醇進行梯度洗脫,最后用70%丙酮洗脫,分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液,合并20%~60%含水甲醇或含水乙醇部位的洗脫液,將合并的洗脫液在50℃以下真空閃蒸濃縮,得到洗脫濃縮液;8)凝膠樹脂分離純化:將上述合并的洗脫濃縮液繼續(xù)通過Toyopearl?HW-40柱色譜,以H
2O、20%?含水甲醇或含水乙醇、40%含水甲醇或含水乙醇、60%含水甲醇或含水乙醇、70%丙酮梯度洗脫;9)步驟8)中20%?含水甲醇或含水乙醇洗脫部位減壓濃縮干燥后,溶于少量水后通過MCI?gel?CHP-20?P柱色譜,以H
2O及不同濃度的含水甲醇或含水乙醇梯度洗脫,TLC檢識,相同流分合并,得化合物2的淺黃色結晶;10)步驟8)中40%?含水甲醇或含水乙醇部位通過Sephadex?LH-20柱色譜,以水及不同濃度的含水甲醇梯度洗脫,TLC檢識,相同流分合并,得化合物1的淺黃色粗品;所述的化合物1為5,7,3′,4′-四羥基-4′′-O?-甲基-3-O-β-D-葡萄糖黃酮苷,其結構式為:
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;所述的化合物2為5,7,3′,4′-四羥基-3-O-[β-D-葡萄糖基-(1→6)]-β-D-葡萄糖黃酮苷,其結構式為:
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。2.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法,其特征在于步驟2)中:浸潤所用的含水乙醇濃度為45%~65%,滲漉提取時所用的含水乙醇濃度為55%~65%,滲漉提取時流速為10~14mL/min。3.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法,其特征在于步驟2)中:浸潤所用的含水乙醇濃度為50%~60%,滲漉提取時所用的含水乙醇濃度為58%~60%,滲漉提取時流速為11~12?mL/min。4.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法,其特征在于步驟3)中:進液速度為200~300?mL?·?min
-1。5.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法,其特征在于步驟3)中:進液速度為220~260?mL?·?min
-1。6.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法,其特征在于步驟4)中:濃縮液與石油醚的體積比為1:1~1:2。7.如權利要求1所述的黃秋葵果實中兩個活性黃酮苷的制備方法,其特征在于步驟7)中:先用H
2O洗脫,再依次用10%含水甲醇或含水乙醇、20%含水甲醇或含水乙醇、40%含水甲醇或含水乙醇、60%含水甲醇或含水乙醇、70%含水甲醇或含水乙醇進行梯度洗脫,最后用70%丙酮洗脫,分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液,合并20%含水甲醇或含水乙醇、40%含水甲醇或含水乙醇、60%含水甲醇或含水乙醇部位的洗脫液。