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生物催化制備(R)-4,4,4-三氟-3-羥基丁酸乙酯的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-10-10
  • 技術成熟度:正在研發
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN200610085921.8 
  • 技術(專利)名稱 生物催化制備(R)-4,4,4-三氟-3-羥基丁酸乙酯的方法 
  • 項目單位 江南大學
  • 發明人 孫志浩 
  • 行業類別 藥品-化學藥品
  • 技術成熟度 正在研發
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 朱樂
  • 發布時間 2021-10-10  
  • 01

    項目簡介

    生物催化制備(R)-4,4,4-三氟-3-羥基丁酸乙酯的方法,屬于生物不對稱還原制備手性鹵代羥基丁酸酯技術領域。本發明利用篩選并保藏的高對映體選擇性羰基還原酶的產生菌葡萄汁酵母(Saccharomyces uvarum)等,在優化條件下發酵產酶,濕菌體在單一水相體系中,以4,4,4-三氟乙酰乙酸乙酯為底物,并添加葡萄糖和大孔樹脂,制備(R)-4,4,4-三氟-3-羥基丁酸乙酯。當底物4,4,4-三氟乙酰乙酸乙酯濃度為30g/L,轉化6h,得到產物(R)-4,4,4-三氟-3-羥基丁酸乙酯濃度26.2g/L、光學純度88.9%e.e、摩爾轉化率87.3%,在整個反應過程中不需要添加輔酶。
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  • 02

    說明書

    1.生物催化制備(R)-4,4,4-三氟-3-羥基丁酸乙酯的方法,其特征是以選擇性羰基還原酶產生菌為出發菌株,在單一水相體系中,以4,4,4-三氟乙酰乙酸乙酯為底物,在酶反應過程中補充添加底物,并添加葡萄糖和大孔樹脂,制備(R)-4,4,4-三氟-3-羥基丁酸乙酯,步驟如下:(1)菌株:葡萄汁酵母(Saccharomyces?uvarum)ATCC26602、CICC?1023、CICC1328、CICC?1494、CICC?1445、CICC?1625,釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)AS2.1429、AS2.23、AS2.146、AS2.240;(2)濕菌體的培養:培養基組成以g/L計為:醋酸鈉10~100,玉米漿10~100,磷酸二氫鉀1~10,硫酸鎂0.1~1,pH為4~9,溫度20~40℃,培養1~5天,發酵液過濾獲得濕菌體;(3)配制反應體系:以4,4,4-三氟乙酰乙酸乙酯為底物,用0.1M,pH?5.0的檸檬酸緩沖液配制成反應體系,底物濃度以g/L計為10~500;(4)酶轉化反應:在反應體系中加入濕菌體,加濕菌體量為1~20g/g底物,酶反應溫度為20~50℃,反應時間為1~20小時;在酶反應過程中補充添加底物,并添加葡萄糖和大孔樹脂;(5)轉化液后處理:轉化液過濾或離心分離菌體,清液以乙酸乙酯萃取,吸附樹脂用乙酸乙酯洗脫,合并萃取液和洗脫液,再脫水,脫色,蒸發回收溶劑,得到無色油狀液體(R)-4,4,4-三氟-3-羥基丁酸乙酯。2.根據權利要求1所述的方法,其特征是所述菌株采用葡萄汁酵母(Saccharomyces?uvarum)ATCC26602。3.根據權利要求1所述的方法,其特征是所述酶轉化反應,底物4,4,4-三氟乙酰乙酸乙酯起始濃度為10g/L,在反應過程中補充添加底物至500g/L。4.根據權利要求1所述的方法,其特征是所述酶轉化反應,在反應過程中添加葡萄糖,其濃度為10~70g/L。5.根據權利要求1所述的方法,其特征是所述酶轉化反應,在反應過程中添加大孔樹脂,樹脂與底物的質量比為0.6~6∶1,大孔樹脂為HPD300。
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