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一種微生物混合發酵生產纖維素酶的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-09-25
  • 技術成熟度:可以量產
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN200710074961.7 
  • 技術(專利)名稱 一種微生物混合發酵生產纖維素酶的方法 
  • 項目單位 東莞理工學院
  • 發明人 鄒水洋,吳清林,鄧韻,王尚武 
  • 行業類別 藥品-化學藥品
  • 技術成熟度 可以量產
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 楊塵飛
  • 發布時間 2021-09-25  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種微生物混合發酵生產纖維素酶的方法。本發明以康寧木霉(Trichoderma koningii)與米根霉(Rhizopus oryzae)為纖維素酶生產菌,接種孢子液或二級種子液于固態或液態培養基中,通過控制培養基的組成、混菌培養過程中康寧木霉與米根霉的生物量以及其它培養條件,可使濾紙酶活力、β-葡萄糖苷酶活力比康寧木霉單菌發酵分別提高60%~100%、400%~500%,并明顯縮短發酵時間。本發明并通過控制兩種微生物的接種量或接種時機,使之形成偏利的微生態關系,從而有利于纖維素酶的分泌并改善酶系的組成。本發明操作簡單易行,成本低,具有良好的應用前景。
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  • 02

    說明書

    1.一種微生物混合發酵生產纖維素酶的方法,其特征在于,將康寧木霉與米根霉兩種微生物接種于固態或液態發酵培養基中,采用固態發酵工藝或液態發酵工藝,混合培養生產纖維素酶,通過控制兩種微生物的生物量培養條件來提高纖維素酶的活力,并改善酶系的組成;所述的固態發酵工藝中的固態發酵培養基的制備方法是:將稻草粉、蔗渣粉、麩皮粉、小麥秸稈粉中的一種或一種以上,與1~3倍重量Mandels營養液混合,調節pH4.5~5.0,110~121℃高壓蒸汽滅菌20~30分鐘;所述的液態發酵工藝中的液態發酵培養基的制備方法是:稻草粉、蔗渣粉、麩皮粉、小麥秸稈粉中的一種或一種以上,共1~5份,加入100份Mandels營養液,調節pH4.5~5.0,裝入自動發酵罐,110~121℃高壓蒸汽滅菌15~30分鐘。2.根據權利要求1所述的微生物混合發酵生產纖維素酶的方法,其特征在于所述的固態發酵工藝的步驟是:(1)液體制種:選擇菌種康寧木霉和米根霉為生產菌株,分別經斜面試管培養、搖瓶擴大培養或發酵罐再擴大培養制備所需二級液體菌種;(2)將康寧木霉和米根霉的斜面菌種制成孢子懸浮液,每毫升孢子數為107~108個,以2~10∶1的體積比例混合,按固態發酵培養基重量的6~14%接種或將康寧木霉和米根霉的二級液體菌種,以2~10∶1的體積比例混合,按固態發酵培養基重量的6~14%接種;接種后在25~35℃、空氣相對濕度70~90%下培養72~144小時,30~48小時翻曲一次,即成固體酶曲;(3)將固體酶曲按1∶8~10的重量比加水浸泡1~4小時后過濾,過濾液即為纖維素酶的提取液;(4)將上述提取液濃縮至原來體積的2/10~4/10可制成高活性液態纖維素酶制劑,濃縮液經噴霧干燥可制成粉狀高活性纖維素酶制劑。3.根據權利要求1所述的微生物混合發酵生產纖維素酶的方法,所述的液態發酵工藝的步驟是:(1)液體制種:選擇菌種康寧木霉和米根霉為生產菌株,分別經斜面試管培養、搖瓶擴大培養或發酵罐再擴大培養制備所需二級液體菌種;(2)先將康寧木霉的二級液體菌種,按液態發酵培養基體積的1~9%接種量接種于液態發酵培養基,20~35℃下通氣培養24~72小時后,再接種1~9%體積的米根霉二級液體菌種,20~35℃下繼續通氣培養24~96小時,將培養液過濾,過濾液即為原酶液;(3)將上述原酶液濃縮至原來體積的2/10~3/10即為高活性液態纖維素酶制劑,濃縮液經噴霧干燥可制成粉狀高活性纖維素酶制劑。
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