本發明公開了一種羧甲基化五味子多糖及其制備方法和應用，屬于多糖改性技術領域。該羧甲基化五味子粗多糖的得率為88.37±1.65%，羧甲基化取代度為0.724±0.022，溶解度為0.5±0.04 mg/mL，是原五味子多糖溶解度的5倍。羧甲基化五味子多糖的溶解度為12.5±0.26 mg/mL，分子量為3.4×10 Da，單糖組成為：甘露糖、葡萄糖和半乳糖，其摩爾比為1:44.84:3.71。本發明反應溫度在40?80°C、反應時間在1?8 h，氯乙酸終濃度在0.005?0.08 g/mL的條件下，所得羧甲基化五味子多糖的得率和取代度均較高，水溶性好，且對持久性有機污染物PCB126致小鼠免疫抑制有顯著的改善作用，可提高小鼠脾臟和胸腺指數，增加血清中TNF?α、IFN?γ和IL?2的水平，可作為免疫增強劑，用作功能食品和食品添加劑。

1.一種羧甲基化五味子多糖，其特征在于：所述羧甲基化五味子多糖的分子量為1.698
×10⁴ Da，所述羧甲基化五味子多糖的單糖組成為：甘露糖、葡萄糖和半乳糖，摩爾比為1:
44.84:3.71，所述羧甲基化五味子多糖的溶解度為12.24-12.76 mg/mL，所述羧甲基化五味
子多糖在水溶液中呈聚集狀形成分子鏈，所述分子鏈的厚度為0.1-1 nm；
按照下述步驟進行：
（1）五味子粗多糖的制備：將新鮮五味子于55-65℃烘箱內干燥12-24h后進行粉碎，采
用石油醚對干燥后的五味子進行回流脫脂2-3次，然后將脫脂后的五味子藥渣以料液比1:
10-1:15加入蒸餾水進行水提，取2-3次得到五味子多糖提取液，五味子多糖提取液經減壓
濃縮，采用80%的乙醇醇沉3-4次，得到的醇沉物經離心后，復溶、揮醇，經截留分子量為3000
Da的透析袋透析12-36h，真空干燥2-3h得到五味子粗多糖；
（2）五味子多糖的羧甲基化：將五味子粗多糖溶于異丙醇溶液中，機械攪拌使其充分溶
解，五味子粗多糖和異丙醇料液比為1:30 - 1:40（g/mL），溶解溫度為20-25℃，攪拌時間為
15-20 min，攪拌速度為60-240 r/min，向溶解后的五味子多糖溶液中加入質量分數為15-
20%的NaOH溶液進行堿化，NaOH溶液的加入量為異丙醇體積的20-30%，堿化溫度為20-25℃，
堿化時間為1-2 h，然后在攪拌狀態下繼續向堿化后的五味子粗多糖反應液中加入氯乙酸
進行羧甲基化，氯乙酸加入量為0.005-0.08 g/mL，水浴溫度為40-80℃，羧甲基化反應時間
為1-8 h，待反應液冷卻后調節反應液pH至中性，采用乙醇醇沉，離心后得到醇沉產物，將醇
沉產物采用少量蒸餾水復溶后進行透析，透析結束后進行真空干燥得到羧甲基化五味子粗
多糖；
（3）純化：將步驟（2）得到的羧甲基化五味子粗多糖溶解于0.05-0.1mol/L 的NaCl溶液
中，然后緩慢滴加至DEAE-52層析柱中，并采用0.05-0.2 mol/L的NaCl溶液進行梯度洗脫，
繪制洗脫曲線，根據洗脫曲線分別收取合并洗脫液，得到羧甲基化五味子多糖不同組分，選
取0.05mol/L NaCl的洗脫組分合并，經截留分子量為3000 Da的透析袋透析、真空干燥后，
得到羧甲基化五味子多糖。
2.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖，其特征在于：所述步驟（1）中五味子粗
多糖的得率為15.9-19.8%，多糖含量為54.4-65.7%，溶解度為0.08-0.12 mg/mL。
3.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖，其特征在于：所述步驟（2）中羧甲基化
五味子粗多糖的得率為60.2-86.4%，羧甲基化取代度為0.41-0.71，溶解度為0.46-0.54
mg/mL。
4.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖，其特征在于：所述步驟（1）中回流脫脂
的溫度為70-80℃，脫脂時間為1-2 h，水提溫度為90-100℃，提取時間為4-6 h。
5.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖，其特征在于：所述步驟（2）中采用80%乙
醇醇沉24-48h，醇沉液以4000-5000rpm轉速離心5-10 min。
6.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖，其特征在于：所述步驟（2）中采用經截
留分子量為3000 Da的透析袋透析首先采用流水透析，最后進行蒸餾水透析，流水透析時間
為36-48h，蒸餾水透析時間為24-36h。
7.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖，其特征在于：所述步驟（2）中真空干燥
時間為2-3h，溫度為20-25℃，真空度為-0.085 - -0.1Mpa。
8.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖，其特征在于：所述步驟（3）中羧甲基化
五味子粗多糖在NaCl溶液中經震蕩加熱溶解，震蕩水浴的溫度為50-60℃，震蕩頻率為120-
160 次/分，震蕩溶解的時間10-12h，然后對溶解后的溶液進行離心分離，溶液離心的轉速
為：4000-5000 r/min，離心時間為8-10 min；
所述步驟（3）中流水透析時間為36-48h，蒸餾水透析時間為24-36h，真空干燥時間為2-
3h，真空干燥溫度為20-25℃，真空干燥的真空度為-0.085 - -0.1MPa。
9.權利要求1所述羧甲基化五味子多糖的應用，其特征在于：所述羧甲基化五味子多糖
能夠作為免疫增強劑用于功能食品和食品添加劑中。