本發(fā)明涉及一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑及其制備方法，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。以牛血清白蛋白(BSA)為模型藥物，以PLGA為載體，采用溶劑揮發(fā)法制備載有BSA的MCS/PLGA/BSA納米混懸劑。粒徑為532.8nm，ζ電位為28.92mv，包封率為89.34％。甘露糖化殼聚糖(MCS)通過靜電作用吸附在PLGA/BSA納米粒表面，不僅提高了納米粒在胃腸液中的穩(wěn)定性，還延長了納米粒在腸腔的滯留時間，而且?guī)д姷募{米粒更容易被細胞攝取。納米粒利用濾泡相關(guān)上皮對納米粒的轉(zhuǎn)運作用轉(zhuǎn)移至PP結(jié)，通過甘露糖配體與抗原呈遞細胞(APCs)上的甘露糖受體結(jié)合，增加APCs攝取，從而誘導(dǎo)免疫反應(yīng)。

1.一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：
(1)將PLGA溶解于適量二氯甲烷中，作為油相；
(2)將蛋白藥物BSA加入去離子水中，使其緩慢溶脹，然后磁力攪拌至完全溶解，作為內(nèi)
水相；
(3)將甘露糖化殼聚糖(MCS)溶于0.5％的醋酸溶液中，使其緩慢溶脹，然后磁力攪拌至
完全溶解，再用氫氧化鈉溶液將其pH調(diào)至5.5左右；
(4)將泊洛沙姆188加入去離子水中，使其緩慢溶脹，然后磁力攪拌至完全溶解；
(5)將MCS溶液與泊洛沙姆188溶液按一定體積比混合，作為外水相；
(6)將內(nèi)水相加至油相中，在冰浴條件下，探頭超聲一段時間，得到水/油初乳；
(7)將油包水初乳加至外水相中，在冰浴條件下，探頭超聲一段時間，得到水/油/水復(fù)
乳；
(8)將復(fù)乳加至稀釋液中，冰浴條件下，磁力攪拌過夜，即得MCS/PLGA/BSA納米混懸劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在于：步
驟(1)中PLGA為羧基末端，分子量為15000，乳酸與羥基乙酸的比例為75∶25。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在于：步
驟(2)中所選擇的藥物僅為模型藥物BSA，但不局限于此，藥物還可以是用于預(yù)防小兒麻痹
癥、流感等疾病的蛋白疫苗。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在于：步
驟(3)中MCS分子量為115kDa，脫乙酰基度＞95％，甘露糖取代度11.2％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在于：步
驟(5)中MCS溶液為1mL，泊洛沙姆188溶液為4mL；MCS溶液濃度在0.125mg/ml～4mg/ml；外水
相中泊洛沙姆濃度在0.1％～5％。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在于：處
方中BSA與PLGA的質(zhì)量比在1∶1～1∶10；PLGA濃度在5mg/ml～80mg/ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在于：處
方中內(nèi)水相、油相和外水相的體積比為0.25∶1∶5。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在于：步
驟(6)中探頭超聲功率為70～500W；超聲時間為3s～15s；步驟(7)中探頭超聲功率為70～
500W；超聲時間為6s～60s。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或8所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在
于：步驟(6)和步驟(7)中，探頭超聲工作時間1s，間隙時間2s。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在于：
步驟(8)中稀釋液是0.1％泊洛沙姆188溶液，體積為20ml。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在于：
步驟(6)、(7)、(8)中均采用冰浴條件。
12.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在
于：步驟(5)中MCS溶液濃度為2mg/ml；外水相中泊洛沙姆濃度為1％。
13.根據(jù)權(quán)利要求1或6所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在
于：處方中BSA與PLGA的質(zhì)量比為1∶4；PLGA濃度為40mg/ml。
14.根據(jù)權(quán)利要求1或8所述一種用于口服蛋白免疫的納米混懸劑制備方法，其特征在
于：步驟(6)中探頭超聲功率為300W；超聲時間為9s；步驟(7)中探頭超聲功率為150W；超聲
時間為15s。