本發明公開一種PRRSV基因標記疫苗株ELISA鑒別診斷試劑盒，所述試劑盒包含25aa多肽抗原，該25aa多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本發明PRRSV基因標記疫苗株ELISA鑒別診斷試劑盒，以PRRSV基因標記疫苗株(rHN4?Δ25+NP49株)特異性標記區域缺失的25aa多肽作為包被抗原，具有特異性強、靈敏度高、重復性好的特點，可快速、準確地區分傳統PRRS疫苗免疫與標記疫苗免疫豬的血清抗體，同時可快速、準確地鑒別診斷出PRRSV基因標記疫苗株與自然感染毒株，對于PRRS基因標記疫苗株的臨床廣泛應用具有重要意義。

1.一種PRRSV基因標記疫苗株ELISA鑒別診斷試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含
25個氨基酸的多肽抗原，該25個氨基酸多肽的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。
2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含ELISA酶標板、封閉
液、血清稀釋液、酶標二抗、顯示液、終止液、標準陽性血清、標準陰性血清。
3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述25個氨基酸多肽抗原的包被濃度為
500ng/孔。
4.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述封閉液為5％重量濃度的脫脂乳。
5.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述血清稀釋液為2％重量濃度的牛血清
白蛋白。
6.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述血清稀釋液對血清的稀釋度為1：
40。
7.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述酶標二抗為辣根過氧化物酶標記的
山羊抗豬抗體，其稀釋度為1：8000。
8.一種非診斷目的的PRRSV基因標記疫苗株ELISA鑒別方法，其特征在于，包括以下
步驟：
用25個氨基酸多肽抗原包被ELISA酶標板，該25個氨基酸多肽的氨基酸序列如SEQID
NO:1所示；
將待測血清與包被抗原作用后，依次加入酶標二抗、顯色液和終止液；
利用酶標儀讀取吸光度值OD₄₅₀nm，并按公式：S/P＝(待測血清樣品OD-陰性對照OD)/(陽
性對照OD-陰性對照OD)，計算待測血清樣品的S/P值；
待測血清樣品S/P值≥臨界值的判為陽性，S/P值<臨界值的判為陰性，所述臨界值是通
過ROC統計學分析方法獲得的當靈敏度和特異度數值之和最大時對應的S/P值。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述待測血清的稀釋度為1：40。