本發明屬于納米生物技術檢測領域，具體是指一種基于噬菌體表面展示多肽配體和仿酶納米材料檢測病原微生物的方法。利用多功能生物納米探針與待檢測靶標病原微生物進行孵育，而后在顯色體系下即可實現對其檢測；其中，多功能生物納米探針為利用生物淘選技術從風景噬菌體文庫中篩選出與病原微生物特異性結合的噬菌體單克隆，再進一步分離純化獲得展示有特異性多肽的噬菌體相應位點的蛋白；而后展示有特異性多肽的噬菌體衣殼蛋白組裝于仿酶納米材料上。本發明探針不僅能特異性識別和結合靶標微生物，又因其仿酶活性可實現信號放大，從而實現副溶血弧菌的免疫比色定量檢測。該方法操作簡單、成本低廉、特異性和靈敏度均較高，為實現致病微生物的靈敏檢測提供了一條有效途徑。

1.一種檢測病原微生物的方法，其特征在于：利用多功能生物納米探針與待檢測靶標
病原微生物進行孵育，而后在顯色體系下即可實現對其檢測；其中，多功能生物納米探針為
利用生物淘選技術從風景噬菌體文庫中篩選出與病原微生物特異性結合的噬菌體單克隆，
再進一步拆分、純化獲得離純化展示有特異性多肽表達的噬菌體主要衣殼蛋白；而后展示
有特異性多肽的噬菌體衣殼蛋白組裝于仿酶納米材料上；
所述多功能生物納米探針為，利用生物淘選技術從風景噬菌體文庫中篩選出與副溶血
弧菌特異性結合的噬菌體單克隆，再進一步純化獲得展示有特異性多肽的噬菌體蛋白主要
衣殼蛋白pVIII（fusion pVIII），再將fusion pVIII組裝在蛋白模板法合成的仿酶納米材
料表面從而構建檢測副溶血弧菌的多功能生物納米探針。
2.按權利要求1所述的檢測病原微生物的方法，其特征在于：所述多功能生物納米探針
的構建首先利用氨基甲酸叔丁酯（BOC）保護fusion pVIII的具有與副溶血弧菌結合活性的
N端，然后將其C端用1-乙基-3-（3-二甲基氨丙基）-碳化二亞胺（EDC）/N-羥基琥珀酰亞胺
(NHS)進行活化，將fusion pVIII組裝在仿酶納米材料（表面pVIII蛋白殘基）后，加入三氟
乙酸將fusion pVIII去BOC保護，使得其N端恢復與副溶血弧菌特異性結合的活性，即可。
3.按權利要求2所述的檢測病原微生物的方法，其特征在于：所述多功能生物納米探針
是通過酰胺鍵將fusion pVIII的C端與仿酶納米材料表面的pVIII蛋白殘基的N端相互作用
構建得到的。
4.按權利要求1、2或3任一項所述的檢測病原微生物的方法，其特征在于：所述多功能
生物納米探針的構建過程中fusion pVIII與仿酶納米材料的摩爾比例為1000:1。