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脂多糖結合蛋白及其單克隆抗體和用途

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-09-06
  • 技術成熟度:正在研發
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN200710078119.0 
  • 技術(專利)名稱 脂多糖結合蛋白及其單克隆抗體和用途 
  • 項目單位 中國人民解放軍第三軍醫大學第一附屬醫院
  • 發明人 葛曉冬 
  • 行業類別 藥品-化學藥品
  • 技術成熟度 正在研發
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 楊雄
  • 發布時間 2021-09-06  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種脂多糖結合蛋白及其單克隆抗體和用途,通過從人肝細胞中提取編碼NH-LBP的cDNA片段,采用昆蟲sf21細胞制備了NH-LBP蛋白,并通過pComb3H噬菌粒建立了人源噬菌體抗體庫,以NH-LBP為抗原進行了篩選,從而制備了抗NH-LBP人源單克隆抗體Fab抗體以及dsFv抗體,該Fab抗體以及dsFv抗體能特異性地與人完整脂多糖結合蛋白的N端結合,競爭性地抑制了LBP與LPS的結合,使得機體對LPS的敏感性下降,降低LPS導致的過度炎癥反應,并促進機體對LPS的降解,從而抑制過度的炎癥反應和防止彌漫性毛細血管內凝血、多臟器衰竭的發生。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種脂多糖結合蛋白氨基端片段,其特征在于,編碼所述脂多糖結合蛋白氨基端片段的DNA序列為:Atgggggccttggccagagccctgccgtccatactgctggcattgctgcttacgtccaccccagaggctctgggtgccaaccccggcttggtcgccaggatcaccgacaagggactgcagtatgcggcccaggaggggctattagctctgcagagtgagctgctcaggatcacgctgcctgacttcaccggggacttgaggatcccccacgtcggccgtgggcgctatgagttccacagcctgaacatccacagctgtgagctgcttcactctgcgctgaggcctgtccctggccagggcctgagtctcagcatctccgactcctccatccgggtccagggcaggtggaaggtgcgcaagtcattcttcaaactacagggctcctttgatgtcagtgtcaagggcatcagcatttcggtcaacctcctgttgggcagcgagtcctccgggaggcccacagttactgcctccagctgcagcagtgacatcgctgacgtggaggtggacatgtcgggagacttggggtggctgttgaacctcttccacaaccagattgagtccaagttccagaaagtactggagagcaggatttgcgaaatgatccagaaatcggtgtcctccgatcatcagccttattctcaaactctg其中,下劃線區為編碼信號肽序列;以基因數據庫上脂多糖結合蛋白基因序列NM_004139為標準,發生點突變的有:G(144)→A(144);T(626)→A(626);A(627)→T(627);C(637)→T(637);T(638)→C(638);C(639)→T(639)。2.一種脂多糖結合蛋白氨基端片段,其特征在于,所述脂多糖結合蛋白氨基端片段的氨基酸序列為:MGALARALPSILLALLLTSTPEALGANPGLVARITDKGLQYAAQEGLLALQSELLRITLPDFTGDLRIPHVGRGRYEFHSLNIHSCELLHSALRPVPGQGLSLSISDSSIRVQGRWKVRKSFFKLQGSFDVSVKGISISVNLLLGSESSGRPTVTASSCSSDIADVEVDMSGDLGWLLNLFHNQIESKFQKVLESRICEMIQKSVSSDHQPYSQTL其中,下劃線區為信號肽的序列;以基因數據庫上脂多糖結合蛋白氨基酸序列NP_004130為標準,發生點突變的有:L(209)→H(209);L(213)→S(213)。3.一種抗脂多糖結合蛋白氨基端片段單克隆Fab抗體,其特征在于,所述Fab抗體輕重鏈VL和VH的可變區基因序列及氨基酸序列如下:輕鏈VL的基因序列為κ輕鏈:ACC?CAG?TCT?CCA?TCC?TCC?CTT?TCT?GCA?TCT?GTC?GGA?GAC?AGA?GTC?ACC?ACCACT?ACG?CGG?GCA?AGT?CAG?GTA?ATT?AGC?AGT?TCT?TTA?GCC?TGG?TAT?CAG?CAAAAA?CCA?GGC?AAA?GCC?CCT?AAA?CTC?CTG?ATC?TAC?GGT?GCG?TCC?ACT?TAC?AAATTG?GGG?TCC?CTT?TAC?GGT?TCA?GCG?GCA?GTG?GGT?CTG?GGA?CCG?ATT?TCA?CTCTCA?CCA?TTG?ACG?TCC?CGC?AGC?CTG?AAG?ATT?CTG?CAA?CTT?ATT?ACT對應氨基酸序列為:TQSPSSLSASVGDRVTTTTRASQVISSSLAWYQQKPGKAPKLLIYGASTYKLGSLYGSAAVGLGPISLSPLTSRSLKILQLIT重鏈VH的基因序列為VH3亞群:GGA?GGC?TTA?GTT?CAA?CCG?GGG?GGG?TCA?CTT?ACA?CTC?TCC?TGT?GCA?GCA?TCTGGA?TTC?CCA?TTC?AGT?ACG?TAC?TGG?ATG?CAC?TGG?GTC?CGT?CAA?GGT?CCA?GGGAAG?CGG?CCG?GTG?TGG?GTC?TCT?CGT?GTC?CAC?AGT?GAA?GGG?AGT?GCC?CGA?AGTTAC?GCG?GGC?GCC?GTG?AAG?GGC?CGA?TTC?ACC?ATC?TCC?AGG?GAC?AAC?GCC?AGGAAC?ACC?GTC?TAT?CTG?CAG?ATG?AAT?AGT?CTG?ACA?GAC?GAA?GAC?ACG?GGT?GTCTAT?TAT?TGT?GCG?AGA對應氨基酸序列為:GGLVQPGGSLTLSCAASGFPFSTYWMHWVRQGPGKRPVWVSRVHSEGSARSYAGAVKGRFTISRDNARNTVYLQMNSLTDEDTGVYYCAR其中,下劃線為CDRS區。4.一種抗脂多糖結合蛋白氨基端片段的dsFv抗體,其特征在于,所述dsFv抗體輕重鏈rVL和VH的可變區基因序列及氨基酸序列如下:輕鏈rVL的基因序列為:ACC?CAG?TCT?CCA?TCC?TCC?CTT?TCT?GCA?TCT?GTC?GGA?GAC?AGA?GTC?ACC?ACCACT?ACG?CGG?GCA?AGT?CAG?GTA?ATT?AGC?AGT?TCT?TTA?GCC?TGG?TAT?CAG?CAAAAA?CCA?GGC?AAA?GCC?CCT?AAA?CTC?TGT?ATC?TAC?GGT?GCG?TCC?ACT?TAC?AAATTG?GGG?TCC?CTT?TAC?GGT?TCA?GCG?GCA?GTG?GGT?CTG?GGA?CCG?ATT?TCA?CTCTCA?CCA?TTG?ACG?TCC?CGC?AGC?CTG?AAG?ATT?CTG?CAA?CTT?ATT?ACT對應氨基酸序列為:TQSPSSLSASVGDRVTTTTRASQVISSSLAWYQQKPGKAPKLCIYGASTYKLGSLYGSAAVGLGPISLSPLTSRSLKILQLIT重鏈VH的基因序列為:GGA?GGC?TTA?GTT?CAA?CCG?GGG?GGG?TCA?CTT?ACA?CTC?TCC?TGT?GCA?GCA?TCTGGA?TTC?CCA?TTC?AGT?ACG?TAC?TGG?ATG?CAC?TGG?GTC?CGT?CAA?GGT?CCA?GGGAAG?CGG?CCG?GTG?TGG?GTC?TCT?CGT?GTC?CAC?AGT?GAA?GGG?AGT?GCC?CGA?AGTTAC?GCG?GGC?GCC?GTG?AAG?GGC?CGA?TTC?ACC?ATC?TCC?AGG?GAC?AAC?GCC?AGGAAC?ACC?GTC?TAT?CTG?CAG?ATG?AAT?AGT?CTG?ACA?GAC?GAA?GAC?ACG?GGT?GTCTAT?TAT?TGT?GCG?AGA對應氨基酸序列為:GGLVQPGGSLTLSCAASGFPFSTYWMHWVRQGPGKRPVWVSRVHSEGSARSYAGAVKGRFTISRDNARNTVYLQMNSLTDEDTGVYYCAR其中,下劃線為CDRS區。5.權利要求3所述的抗脂多糖結合蛋白氨基端片段單克隆Fab抗體的應用,其特征在于,所述的抗脂多糖結合蛋白氨基端片段單克隆Fab抗體在制備治療炎癥藥物中的應用。6.根據權利要求5所述的抗脂多糖結合蛋白氨基端片段單克隆Fab抗體的應用,其特征在于,所述炎癥為燒傷腸源性感染或者痢疾桿菌所致的感染。7.權利要求4所述的抗脂多糖結合蛋白氨基端片段的dsFv抗體的應用,其特征在于,所述抗脂多糖結合蛋白氨基端片段的dsFv抗體在制備治療炎癥藥物中的應用。8.根據權利要求7所述的抗脂多糖結合蛋白氨基端片段的dsFv抗體的應用,其特征在于,所述炎癥為燒傷腸源性感染或者痢疾桿菌所致的感染。9.權利要求3所述的抗脂多糖結合蛋白氨基端片段單克隆Fab抗體的應用,其特征在于,所述抗脂多糖結合蛋白氨基端片段單克隆Fab抗體在制備檢測體內脂多糖結合蛋白水平的藥物中的應用。10.權利要求4所述的抗脂多糖結合蛋白氨基端片段的dsFv抗體的應用,其特征在于,所述抗脂多糖結合蛋白氨基端片段的dsFv抗體在制備檢測體內脂多糖結合蛋白水平的藥物中的應用。
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