本發(fā)明旨在研究以乳清濃縮蛋白為原料，對(duì)具有降低血清膽固醇水平的活性肽進(jìn)行深入、系統(tǒng)的研究，研究生物酶技術(shù)、膜分級(jí)分離濃縮和多級(jí)色譜分離純化技術(shù)，制出一些小分子量并具有降膽固醇功能乳清蛋白水解肽，為工業(yè)化生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)支撐。本發(fā)明采用多級(jí)色譜進(jìn)行分離純化，所得組分純度以及膽固醇膠束溶解度抑制率更高，在凝膠過濾時(shí)采用去離子水作為洗脫液，與以往的鹽類洗脫液相比更加溫和，能很好的達(dá)到分離效果，并且不會(huì)帶來鹽離子，避免帶來健康隱患。本發(fā)明所得產(chǎn)品安全性極高，無毒副作用，具有降低血清膽固醇水平的功能，易作為功能因子添加到各類保健食品中，可用于食品和醫(yī)藥行業(yè)，具有良好的市場前景。

1.一種降膽固醇肽產(chǎn)品，其特征在于，其制備步驟為：用堿性蛋白酶水解乳清蛋白溶液，得到乳清蛋白水解肽溶液，利用超濾粗分離、樹脂脫鹽及多級(jí)色譜分離純化技術(shù)，逐步分級(jí)分離出膽固醇膠束溶解度抑制活性高的降膽固醇肽產(chǎn)品，并采用模擬人體胃腸道試驗(yàn)研究其穩(wěn)定性，結(jié)果表明此肽在體內(nèi)的穩(wěn)定性強(qiáng)；其中，所述乳清蛋白溶液通過乳清濃縮蛋白WPC80配制得到，質(zhì)量濃度是5%，加酶量為每1g乳清蛋白加堿性蛋白酶6000-7000U，水解溫度是55℃，pH為9.0，水解度為23.18%；超濾膜截留分子量為10kDa，溫度為30℃，壓力為0.15MPa；樹脂是大孔吸附樹脂DA201-C；脫鹽的條件為：靜態(tài)搖床處理24h，動(dòng)態(tài)洗脫流速為1BV/h，用70%的乙醇洗脫；第一級(jí)色譜為凝膠過濾色譜，采用的是?KTA?prime蛋白質(zhì)純化系統(tǒng)，填料為具有分子篩作用的SepHadexG-50，洗脫液為去離子水，壓力為1.0MPa，流速為1mL/min，紫外檢測波長為280nm，經(jīng)凝膠過濾色譜純化后，得到的第二個(gè)組分峰的膽固醇膠束溶解度抑制率最高為47.67%，經(jīng)分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其分子量在1900~3100Da范圍內(nèi)；第二級(jí)色譜是反相高效液相色譜（RP-HPLC），色譜柱：C18色譜柱，流動(dòng)相：A，0.1%的三氟乙酸水溶液；B，0.09%的三氟乙酸乙腈溶液；梯度洗脫程序，檢測波長：215nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL；經(jīng)反相高效液相色譜純化后得到的14個(gè)組分峰中，第五個(gè)洗脫峰的膽固醇膠束溶解度抑制率最高，為58.77%，分子量為2454Da。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述產(chǎn)品，采用模擬人體胃腸道試驗(yàn)研究其穩(wěn)定性，是體外模擬人體胃腸道環(huán)境兩個(gè)階段的消化過程，并分別測定消化前后其膽固醇膠束溶解度抑制活性的變化，來確定其穩(wěn)定性；結(jié)果表明，經(jīng)過兩個(gè)階段的消化過程，產(chǎn)品的膽固醇膠束溶解度抑制率從58.77%下降到53.52%。