本發明提供了一種多重PCR鑒別分枝桿菌病原核酸的試劑盒，包括引物組合物：5'?acggtgggtactaggtgtgggtttc?3'、5'?tctgcgattagcgactaagacttca?3'；5'?gcgttgaccgagatggattat?3'、5'?gctcatctcacccagttggc?3'；5'?ttccgaatcccttgtga?3'、5'?ggagagcgccgttgta?3'或5'?agtcgccgtggcttctctttta?3'。本發明該試劑盒靈敏度好，特異性高，操作簡單，能實現致病性與非致病性分枝桿菌快速、大通量的檢測。

1.一種多重PCR鑒別分枝桿菌病原核酸的試劑盒，其特征在于：包括引物組合物：16S
rRNA-F：5'-acggtgggtactaggtgtgggtttc-3'、16S rRNA-R：5'-
tctgcgattagcgactaagacttca-3'；RV3873-F：5'-gcgttgaccgagatggattat-3'、RV3873-R：
5'-gctcatctcacccagttggc-3'；RV1506c-F：5'-ttccgaatcccttgtga-3'、RV1506c-R1：5'-
ggagagcgccgttgta-3'、RV1506c-R2：5'-agtcgccgtggcttctctttta-3'。
2.根據權利要求1所述的一種多重PCR鑒別分枝桿菌病原核酸的試劑盒，其特征在于：
所述的引物組合物針對分枝桿菌屬16sRNA保守區、結核分枝桿菌復合群RD1的RV3873基因
和區分結核分支桿菌與牛結核分支桿菌的RV1506c基因進行同時擴增，生成特異性的擴增
片段。
3.根據權利要求1所述的一種多重PCR鑒別分枝桿菌病原核酸的試劑盒，其特征在于：
所述的多重PCR的反應程序為：預變性95℃，5min，再經95℃變性45s，57℃退火45s，72℃延
伸50s，30個循環，72℃延伸10min。
4.權利要求1所述的一種多重PCR鑒別分枝桿菌病原核酸的試劑盒在制備檢測和鑒別
致病性和非致病性分枝桿菌病原試劑盒中的應用。