本發(fā)明提供一種血清β?羥丁酸試劑盒及其檢測方法，血清β?羥丁酸試劑盒，它包括R1與R2試劑，R1試劑包含如下組分：磷酸鉀緩沖液100～150mmol/L，PH7～8；輔酶2～5mmol/L；黃遞酶2～5KU/L；氯化硝基四氮唑蘭0.5～1mmol/L；BSA0.5～1g/L；海藻糖2～5g/L；R2試劑包含如下組分：酸鉀緩沖液100～150mmol/L，PH7～8；β?羥丁酸脫氫酶20～50KU/L；BSA2～5g/L。本發(fā)明的試劑盒采用氯化硝基四氮唑蘭作為顯色劑，具有穩(wěn)定性好，線性高，抗干擾能力強(qiáng)和成本低的特點(diǎn)；本發(fā)明的血清β?羥丁酸檢測方法，能有效提高減少非特異性還原物質(zhì)的干擾，消除標(biāo)準(zhǔn)液的基質(zhì)效應(yīng)和脂濁現(xiàn)象，具有廣泛的市場前景。

1.一種血清β-羥丁酸試劑盒，它包括R1與R2試劑，其特征在于：
所述R1試劑包含如下組分：
磷酸鉀緩沖液， 100～150 mmol/L，PH7～8；
輔酶， 2～5mmol/L；
黃遞酶， 2～5KU/L；
氯化硝基四氮唑蘭， 0.5～1mmol/L；
BSA， 0.5～1g/L；
海藻糖， 2～5g/L；
所述R2試劑包含如下組分：
磷酸鉀緩沖液， 100～150mmol/L，PH7～8；
β-羥丁酸脫氫酶， 20～50KU/L；
BSA， 2～5g/L。
2.權(quán)利要求1所述的血清β-羥丁酸試劑盒的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：
第一步，預(yù)備：
提供標(biāo)準(zhǔn)液、血清β-羥丁酸測定試劑盒R1與R2試劑以及待測標(biāo)本；其中，標(biāo)準(zhǔn)液采用健
康人血清為基質(zhì)；
第二步，初步混勻：
取6ul待測標(biāo)本和R1試劑240～280ul混勻，置30-45℃孵育3～5分鐘；
第三步，二次混勻：
取R2試劑40～70ul與上述混合液混勻，孵育180～240秒后，空白管調(diào)零，讀取吸光度
A1，90秒后讀吸光度A2，其中，測區(qū)吸光度的主波長500～600nm，副波長650～750nm，ΔA=
A2- A1；
第四步，計(jì)算：
根據(jù)如下公式計(jì)算得出血清β-羥丁酸濃度：
血清β-羥丁酸（mmol/L）= ΔA測定×標(biāo)準(zhǔn)濃度/ΔA標(biāo)準(zhǔn) 。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的血清β-羥丁酸試劑盒的檢測方法，其特征在于：
第一步，預(yù)備：
血清β-羥丁酸測定試劑盒R1與R2試劑與待測標(biāo)本的比例為：40～50 : 8～12 : 1。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的血清β-羥丁酸試劑盒的檢測方法，其特征在于：
第一步，預(yù)備：
標(biāo)準(zhǔn)液采用健康人血清為基質(zhì)，所述標(biāo)準(zhǔn)液的制備方法為：
用健康人血清混合，反復(fù)凍融數(shù)次至上層澄清，取澄清的上層液經(jīng)0.15um～0.30um濾
膜的過濾器過濾后，添加0.05%～0.1wt%生物防腐劑，混勻，待用；用做標(biāo)準(zhǔn)液的基質(zhì)，經(jīng)二
級(jí)或一級(jí)參考品和參考測量方法量值溯源定值。