本發明公開了一種快速鑒別和診斷豬偽狂犬病病毒強弱毒的納米PCR檢測試劑盒及其應用，該試劑盒包括2×Nano PCR緩沖液，Taq DNA聚合酶，引物混合物，DNA聚合酶，無核酸ddHO。為了達到更好的檢測效果，本發明的試劑盒還可以含有模板混合物以及穩定劑。本發明試劑盒解決了使用現有試劑盒檢測耗時長，繁瑣、敏感性低的缺點，提高了敏感性，做到早期快速檢出病毒。本發明試劑盒具有特異性強、靈敏度高，適于早期快速診斷等特點，并且可以鑒別基因缺失株與野毒株感染。同時，本試劑盒能廣泛應于基層獸醫檢測機構，對規模化養豬場PRV的檢測、確診及鑒別診斷有重要意義。

1.一種快速鑒別和診斷豬偽狂犬病病毒強弱毒的納米PCR檢測試劑盒，其特
征在于其組成成分包括：2×Nano?PCR緩沖液，DNA聚合酶，引物混合物，無核酸
ddH₂O，其中所述的引物混合物由3對引物組成，第1對引物的序列分別為SEQ?ID?
NO:1和SEQ?ID?NO:2所示，第2對引物的序列分別為SEQ?ID?NO:3和SEQ?ID?NO:4
所示，第3對引物的序列分別為SEQ?ID?NO:5和SEQ?ID?NO:6所示。
2.按照權利要求1所述的納米PCR檢測試劑盒，其特征在于所述的引物混合
物由3對引物按照等摩爾比組成。
3.按照權利要求1或2所述的納米PCR檢測試劑盒，其特征在于還包括豬偽
狂犬病病毒野毒的陽性對照質粒及豬偽狂犬病病毒gE基因缺失疫苗株陽性對照
質粒。
4.按照權利要求3所述的納米PCR檢測試劑盒，其特征在于所述的豬偽狂犬
病病毒野毒的陽性對照質粒為含有豬偽狂犬病病毒gE基因及/或含有豬偽狂犬病病
毒gB基因的質粒；所述的豬偽狂犬病病毒gE基因缺失疫苗株陽性對照質粒為含
有豬偽狂犬病病毒gG基因及/或含有豬偽狂犬病病毒gB基因的質粒。
5.按照權利要求1所述的納米PCR檢測試劑盒，其特征在于還含有穩定劑。
6.按照權利要求5所述的納米PCR檢測試劑盒，其特征在于所述的穩定劑為
二甲基亞砜(DMSO)。
7.權利要求1-6任一項所述的納米PCR檢測試劑盒在制備鑒別豬偽狂犬病病
毒野毒株及豬偽狂犬病病毒gE基因缺失疫苗株試劑中的應用。
8.權利要求1-6任一項所述的納米PCR檢測試劑盒在制備診斷豬偽狂犬病病
毒野毒株及豬偽狂犬病病毒gE基因缺失疫苗株試劑中的應用。