本發(fā)明涉及基因突變檢測(cè)領(lǐng)域，具體講，涉及一種靶向測(cè)序試劑盒及其使用方法及靶向測(cè)序方法。本發(fā)明的靶向測(cè)序試劑盒包括目的片段擴(kuò)增試劑，目的片段擴(kuò)增試劑包括用于擴(kuò)增人B細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病的突變位點(diǎn)的特異性引物。本發(fā)明試劑盒及方法利用靶向測(cè)序?qū)細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病相關(guān)基因的多個(gè)目標(biāo)區(qū)域同時(shí)進(jìn)行深度測(cè)序，提高了檢測(cè)效率，同時(shí)還能提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈敏度，并能進(jìn)一步對(duì)大量樣品同時(shí)進(jìn)行多區(qū)域測(cè)序。

1.一種靶向測(cè)序試劑盒，其特征在于，所述靶向測(cè)序試劑盒包括目的片段擴(kuò)增試劑，所述目的片段擴(kuò)增試劑包括用于擴(kuò)增人B細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病的突變位點(diǎn)的特異性引物；所述特異性引物的設(shè)計(jì)區(qū)域?yàn)镵MT2D CDS區(qū)域、BCL2 CDS區(qū)域、CREBBP CDS區(qū)域、EZH2CDS區(qū)域、CARD11 CDS區(qū)域、EP300 CDS區(qū)域、TNFRSF14 CDS區(qū)域、RRAGC CDS區(qū)域、ATP6V1B2CDS區(qū)域、ATP6AP1 CDS區(qū)域、PTPRD CDS區(qū)域、KLF2 CDS區(qū)域、NOTCH2 CDS區(qū)域、MYD88 CDS區(qū)域、BIRC3 CDS區(qū)域、ARID1A CDS區(qū)域、CXCR4 CDS區(qū)域、CDKN1B CDS區(qū)域、MAP2K1 CDS區(qū)域、SF3B1 CDS區(qū)域、ATM CDS區(qū)域、POT1 CDS區(qū)域、CHD2 CDS區(qū)域、XPO1 CDS區(qū)域、RPS15 CDS區(qū)域、IGLL5 CDS區(qū)域、EGR2 CDS區(qū)域、FBXW7 CDS區(qū)域、SAMHD1 CDS區(qū)域、LRP1B CDS區(qū)域、CCND1 CDS區(qū)域、NFKBIE CDS區(qū)域、TET2 CDS區(qū)域、PLCG2 CDS區(qū)域、BTK CDS區(qū)域、FOXO1 CDS區(qū)域、FAT1 CDS區(qū)域、TP53 Exon區(qū)域、NOTCH1 Exon區(qū)域、BRAF V600E突變位點(diǎn)、KRAS G12突變位點(diǎn)、KRAS G13突變位點(diǎn)、KRAS Q61突變位點(diǎn)和KRAS A146突變位點(diǎn)；所述用于擴(kuò)增人B細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病的突變位點(diǎn)的特異性引物分別為：SEQID NO:1～SEQ ID NO:2120。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向測(cè)序試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括目的片段純化試劑和目的片段純化產(chǎn)物定量試劑；所述目的片段純化試劑用于對(duì)目的片段擴(kuò)增后的產(chǎn)物進(jìn)行純化；所述目的片段純化產(chǎn)物定量試劑用于對(duì)純化后的目的片段進(jìn)行定量。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向測(cè)序試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括樣本處理試劑，用于獲得待測(cè)樣本的DNA。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的靶向測(cè)序試劑盒，其特征在于，所述待測(cè)樣本包括全血、血清、血漿和組織樣品。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的靶向測(cè)序試劑盒，其特征在于，所述組織樣品包括石蠟包埋組織、新鮮組織和冰凍切片。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向測(cè)序試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括樣本PCR擴(kuò)增試劑，用于擴(kuò)增待測(cè)樣本的DNA。