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血清或血漿中的外泌體制備試劑盒及外泌體制備方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-12-20
  • 技術成熟度:正在研發(fā)
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201810865076.9 
  • 技術(專利)名稱 血清或血漿中的外泌體制備試劑盒及外泌體制備方法 
  • 項目單位 北京全式金生物技術有限公司
  • 發(fā)明人 李晶,曹洋,馬靜,辛文 
  • 行業(yè)類別 醫(yī)藥制造-生物藥品
  • 技術成熟度 正在研發(fā)
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 韓俊哲
  • 發(fā)布時間 2021-12-20  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明公開一種血清或血漿中的外泌體制備試劑盒及外泌體制備方法,所述試劑盒包括外泌體提取試劑,所述外泌體提取試劑為親水聚合物或親水聚合物的溶液;所述親水聚合物包括PEG、硫酸葡聚糖、PVP中的一種或幾種的組合,所述PEG的分子量為20,000?1,200,000道爾頓,所述硫酸葡聚糖的分子量為5,000?20,000道爾頓,所述PVP的分子量為10,000或40,000?700,000道爾頓,利用該試劑盒得到的外泌體粒徑分布更集中;本發(fā)明提供的外泌體制備方法還優(yōu)化了外泌體純化步驟,使得外泌體的雜質更少,純度更高。
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  • 02

    說明書

    1.一種血清或血漿中的外泌體制備試劑盒,其特征在于,包括外泌體提取試劑和瓊脂糖珠;其中,所述外泌體提取試劑為親水聚合物或親水聚合物的溶液;所述親水聚合物包括PEG、硫酸葡聚糖、PVP中的一種或幾種的組合;所述PEG的分子量為20,000-1,200,000道爾頓,所述硫酸葡聚糖的分子量為5,000-20,000道爾頓,所述PVP的分子量為10,000或40,000-700,000道爾頓;所述瓊脂糖珠為Protein G與丁基-瓊脂糖凝膠4B的組合,且Protein G與丁基-瓊脂糖凝膠4B的組成比例為1:1-20:1。2.根據(jù)權利要求1所述的外泌體制備試劑盒,其特征在于,所述親水聚合物的溶液為水溶液、鹽溶液或有機溶液;所述親水聚合物的總濃度為1-500mg/ml。3.根據(jù)權利要求1所述的外泌體制備試劑盒,其特征在于,所述親水聚合物包括PEG和PVP中的至少一種與硫酸葡聚糖的組合,所述硫酸葡聚糖的濃度為1-250mg/ml。4.一種如權利要求1-3任一所述的外泌體制備試劑盒在制備分離外泌體或外泌體類似雙層脂膜囊泡中的應用。5.一種利用如權利要求1-3任一所述的外泌體制備試劑盒制備血清或血漿中外泌體的方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)向血清或血漿中加入1/4倍體積至1倍體積的外泌體提取試劑,混勻,4℃靜置 30分鐘,10,000g 離心10分鐘;(2)去除上清,收集沉淀,再次離心10,000g,5分鐘,去除殘余上清,得到外泌體沉淀;(3)向所述外泌體沉淀中加入外泌體溶解試劑,得到外泌體溶解液;(4)將步驟(3)獲得的外泌體溶解液與瓊脂糖珠4℃混勻2小時,4000g離心3分鐘,收集上清即為高純度外泌體。6.根據(jù)權利要求5所述的制備血清或血漿中外泌體的方法,其特征在于,還包括向血清或血漿中加入Proteinase K進行預處理的步驟。
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