本發明公開了一種檢測CYP3A4、CYP3A5多態性位點的試劑盒及其方法，包含序列表中序列1?4所示CYP3A4*1G的特異性上下游引物序列、序列5?8所示CYP3A4*1G的特異性TaqMan?MGB雙熒光探針序列、序列9?12所示CYP3A5*3的特異性上下游引物序列和序列13?16所示CYP3A5*3的特異性TaqMan?MGB雙熒光探針序列。本發明的有益效果為特異性強、防污染、靈敏度高、檢測速度快、結果分析簡單且準確性高、該試劑盒可以通過檢測CYP3A4、CYP3A5基因多態性位點，判斷待測對象對芬太尼類藥物的代謝能力，從而更準確有效地指導芬太尼類等藥物的用藥，具有實際的臨床應用價值。將該試劑盒應用于臨床的診斷后，與現有技術的吻合度更高，且價格低廉、可重復性高。

1.一種檢測CYP3A4、CYP3A5多態性位點的試劑盒，該試劑盒包括引物，特異性TaqMan雙
熒光探針和PCR擴增試劑，其中檢測試劑盒分成兩組：
A組
用于檢測位點CYP3A4*1G的引物序列：
SEQ1：5'CAGAGCCTTCCTACATAGAG 3'；
SEQ2：5'GGCCCAATCAATTATCTTTA 3'；
用于檢測位點CYP3A4*1G的探針序列：
SEQ3：5'FAM-TCTCCATGTACCATCCACTC-3'MGB；
SEQ4：5'VIC-TCTCCATGTATCATCCACTC-3'MGB；
用于檢測位點CYP3A5*3的引物序列：
SEQ5：5'AGAGTGGCATAGGAGATACC 3'；
SEQ6：5'GTGTGACACACAGCAAGAGT 3'；
用于檢測位點CYP3A5*3的探針序列：
SEQ7：5'FAM-TTGTCTTTCAATATCTCTTCCC-3'MGB；
SEQ8：5'VIC-TTGTCTTTCAGTATCTCTTCCC-3'MGB；
B組
用于檢測位點CYP3A4*1G的引物序列：
SEQ9：5'CTTACGCTTCTGCCAGTAG 3'；
SEQ10：5'TATGTATGAACTGGCCACTC 3'；
用于檢測位點CYP3A4*1G的探針序列：
SEQ11：5'FAM-CTCCATGTACCATCCACT-3'MGB；
SEQ12：5'VIC-CTCCATGTATCATCCACT-3'MGB；
用于檢測位點CYP3A5*3的引物序列：
SEQ13：5'GAGAGTGGCATAGGAGATAC 3'；
SEQ14：5'AAGCCAGACTTTGATCATTA 3'；
用于檢測位點CYP3A5*3的探針序列：
SEQ15：5'FAM-TGTCTTTCAATATCTCTTCCC-3'MGB；
SEQ16：5'VIC-TGTCTTTCAGTATCTCTTCCC-3'MGB；
所述特異性TaqMan雙熒光探針分為特異性野生型TaqMan熒光探針和特異性突變型
TaqMan熒光探針，其5’端連接有熒光報告基團，3’端連接有淬滅基團；所述特異性野生型
TaqMan熒光探針和所述特異性突變型TaqMan熒光探針的熒光報告基團肯定是不同的，淬滅
基團可相同可不同；
所述熒光報告基團可選自下組的報告基團：FAM、VIC、TET、JOE、HEX；
所述淬滅基團可選自下組的淬滅基團：BHQ1、BHQ2、TAMRA、MGB；
所述特異性野生型TaqMan熒光探針的熒光報告基團為FAM，淬滅基團為MGB；所述特異
性突變型TaqMan熒光探針的熒光報告基團為VIC，淬滅基團為MGB。
2.根據權利要求1所述的一種檢測CYP3A4、CYP3A5多態性位點的試劑盒，其特征在于，
所述PCR擴增試劑包含dATP、dCTP、dGTP、dUTP、dTTP、UDG酶、Taq酶和dd H₂O。