本發明公開一種傳染性胰臟壞死病毒的快速檢測試劑盒及其檢測方法。本發明包括由Bst DNA聚合酶、逆轉錄酶、反應緩沖液、環介導等溫擴增混合液、引物混合液和熒光顯色劑共6種試劑組成的試劑盒，以及使用該試劑盒檢測魚類樣品中傳染性胰臟壞死病毒的一套檢測操作程序，以實現對傳染性胰臟壞死病毒快速檢測的標準化，為魚類的健康養殖和國際魚類貿易的發展提供科學依據。本發明具有特異性好、靈敏度高、操作簡便、高效等優點，可廣泛的應用于水產養殖場以及進出口魚類貿易中的現場即時檢測，并可以為相關基礎研究提供技術支持，具有廣泛應用前景。

1.一種傳染性胰臟壞死病毒的快速檢測試劑盒，其特征在于試劑盒中包括試劑A-F：試劑A：BstDNA聚合酶，8U/μL；試劑B：逆轉錄酶，200U/μL；試劑C：反應緩沖液，其中含有200mmol/LpH8.8的三羥基甲基氨基甲烷-鹽酸、100mmol/L氯化鉀、100mmol/L硫酸銨、80mmol/L硫酸鎂和1％曲拉通X-100；試劑D：環介導等溫擴增混合液，其中含有4.0μL?2.5mmol/L?dNTP、2.0μL?10mol/L甜菜堿、0.5μL200U/μL?RNA酶抑制劑和5-6μL分子生物學級超純水；試劑E：引物混合液，其中含有2μL?20μmol/L正向內引物、2μL?20μmol/L反向內引物、1μL?5μmol/L正向外引物、1μL?5μmol/L反向外引物和1μL?20μmol/L環引物；其中引物序列分別如下：正向內引物：5′-GGCCCCGTTCATTGACTGGATTTTGACAAGCCATACGTCCGC-3′；反向內引物：5′-CGGAGGTACGAGATCGACCTCCTTTTCCCTCGTAGAGAGTGGTGAG-3′；正向外引物：5′-CCAAAGGAGTCACAGTCCTG-3′；反向外引物：5′-GTFGACGATGTCGGCGTT-3′；環引物：5′-TGGGGTGTCTCGTCCTCTA-3′。試劑F：熒光顯色劑，成分為100×的熒光染料SYBR?GREEN?I。