本發(fā)明涉及精子凍存領(lǐng)域，特別涉及一種精子凍存液及其制備方法和應(yīng)用。一種精子凍存液，包括以下組分：氯化鉀、硫酸鎂、氯化鈣、碳酸氫鈉、磷酸氫二鉀、丙酮酸鈉、乳酸鈣、葡萄糖、蔗糖、谷氨酰胺、甘氨酸、HEPES、慶大霉素、甘油、人血清白蛋白、維生素E、維生素C、維生素B12。本發(fā)明提供的精子凍存液，各組分共同配合，更全面的維持精子的滲透壓、抵抗外界環(huán)境變化的應(yīng)變能力等，該凍存液用于精子液體的低溫保存后，能較長(zhǎng)期限的保持精子的存活率以及活性。

1.一種人類精子凍存液，其特征在于，以所述凍存液的體積計(jì)，由以下組分組成：氯化鉀5.5±0.2mM，硫酸鎂0.40±0.05mM，氯化鈣2.0±0.1mM，碳酸氫鈉25.0±0.5mM，磷酸氫二鉀0.20±0.01mM，丙酮酸鈉0.20±0.01mM，乳酸鈣2.00±0.05mM，葡萄糖8.0±0.2mM，蔗糖40.0±0.5mM，谷氨酰胺0.10±0.01mM，甘氨酸1.00±0.05mM，HEPES20.0±0.5mM，慶大霉素1.0±0.05mg/ml，甘油體積百分?jǐn)?shù)10％±1％，人血清白蛋白5±0.2mg/ml，維生素E100±10μg/ml，維生素C100±10μg/ml，維生素B12 100±10μg/ml；所述精子凍存液的pH值為7.1-7.5，滲透壓為590-610mOsm/kg；進(jìn)一步地，內(nèi)毒素含量小于1.0EU/ml。2.權(quán)利要求1所述的人類精子凍存液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：(a)氯化鉀、硫酸鎂、氯化鈣、碳酸氫鈉、磷酸氫二鉀、丙酮酸鈉、乳酸鈣、葡萄糖、蔗糖和HEPES加水制成溶液；(b)加入谷氨酰胺、甘氨酸、慶大霉素、甘油、維生素E、維生素C和維生素B12，混合均勻；(c)加入人血清白蛋白，定容即可。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的人類精子凍存液的制備方法，其特征在于，步驟(a)中制成的溶液進(jìn)行過濾后再進(jìn)行步驟(b)的步驟。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的人類精子凍存液的制備方法，其特征在于，所述過濾采用0.22μm濾膜過濾。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的人類精子凍存液的制備方法，其特征在于，步驟(b)得到的溶液的滲透壓為580-600mOsm/kg，pH值為7.0-7.4。6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的人類精子凍存液的制備方法，其特征在于，步驟(c)定容后還包括過濾的步驟，該過濾采用0.22μm濾膜過濾。7.一種人類精子的保存方法，其特征在于，精子液體與權(quán)利要求1提供的所述的精子凍存液以體積比為1:2混合，進(jìn)行梯度低溫凍存，然后保存在液氮中。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的人類精子的保存方法，其特征在于，所述梯度低溫凍存按以下程序進(jìn)行：4℃5分鐘；-20℃5分鐘；-80℃5分鐘。9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的人類精子的保存方法，其特征在于，所述精子液體與所述人類精子凍存液混合后，室溫靜置5分鐘后進(jìn)行凍存程序。