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一種構建高通量測序文庫的方法和試劑盒

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-17
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

專利推薦

  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201610232330.2 
  • 技術(專利)名稱 一種構建高通量測序文庫的方法和試劑盒 
  • 項目單位 大連晶泰生物技術有限公司
  • 發明人 劉琦,趙金銀,邢曉星,許立志,于闖,李杰,明鴻博 
  • 行業類別 醫藥制造-生物藥品
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 秦一燦
  • 發布時間 2022-01-17  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種構建可以同時捕獲多個擴增片段的測序文庫的方法和試劑盒。所述方法包括以下步驟:第一輪擴增;消化引物;第二輪擴增;純化回收;測序;分析。本發明通過合理的引物設計和PCR策略,在PCR產物的5`末端直接添加D5接頭引物和D7接頭引物序列。通過對每個樣本都引入可區分的標簽序列,使樣本在第二代高通量測序技術檢測時,每個樣本的測序結果都可以通過其獨特的標簽序列找回,可以應用于同時檢測大量樣本的多個不同基因位點,大大降低了測序成本。
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  • 02

    說明書

    1.一種構建包括BRCA1基因和BRCA2基因外顯子區域的測序文庫的試劑盒,其中,所述BRCA1基因包括23個外顯子區域,以及BRCA2基因包括27個外顯子區域,所述試劑盒包括:第一輪擴增引物的組合,其包括: 第二輪擴增引物的組合,其包括選自由D501~D508(SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:8)中之一和D701~D712(SEQ ID NO:9~SEQ ID NO:20)之一組成的標簽引物序列的一對或多對,以使各樣本可區分: 2.根據權利要求1所述的試劑盒,其中,所述試劑盒進一步包括:單鏈消化酶;和/或,用于擴增的酶;和/或,0.6-0.9x磁珠。3.根據權利要求2所述的試劑盒,其中,所述單鏈消化酶為核酸外切酶I;和/或,所述用于擴增的酶為高保真DNA聚合酶。
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