本發明公開了一種ROS1融合基因ARMS熒光定量PCR分型檢測試劑盒，包括：用于檢測ROS1融合基因變體的正向引物、共用反向引物和熒光探針；所述正向引物為SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.10所示的十種單鏈DNA中的至少一種；所述共用反向引物為SEQ ID NO.11至SEQ ID NO.13所示的三種單鏈DNA中的至少一種；所述熒光探針為SEQ ID NO.14至SEQ ID NO.16所示的三種單鏈DNA中的至少一種。本發明還公開了ROS1融合基因變體的檢測方法。本發明針對ROS1融合基因變體設計了特異性引物和熒光探針，提高了對ROS1融合基因變體檢測的敏感性和特異性，假陽性低。

1.一種ROS1融合基因ARMS熒光定量PCR分型檢測試劑盒，其特征在于，包括：用于檢測
ROS1融合基因變體的正向引物、共用反向引物和熒光探針；具體包括：用于檢測ROS1融合基
因變體Variant 1、Variant 9和Variant 10的正向引物、共用反向引物和熒光探針，其正向
引物序列分別如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示；共用反向引物序列如SEQ
ID NO.11所示；熒光探針序列如SEQ ID NO.14所示；
用于檢測ROS1融合基因變體Variant 2、Variant3、Variant 5和Variant 6的正向引
物、共用反向引物和熒光探針，其正向引物序列分別如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID
NO.6和SEQ ID NO.7所示；共用反向引物序列如SEQ ID NO.12所示；熒光探針序列如SEQ ID
NO.15所示；
用于檢測ROS1融合基因變體Variant4、Variant 7和Variant 8的正向引物、共用反向
引物和熒光探針，其正向引物序列分別如SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示；
共用反向引物序列如SEQ ID NO.13所示；熒光探針序列如SEQ ID NO.16所示。
2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光探針的5′端標記有FAM熒光報告
基團，3’端標記MGB熒光淬滅基團。
3.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，該試劑盒中，還包括如下物質中的至少一
種：陽性對照和熒光定量反應液預混液。
4.如權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述陽性對照為分別包含ROS1融合基因變
體Variant 1、Variant 2、Variant 3、Variant 4、Variant 5、Variant 6、Variant 7、
Variant 8、Variant 9和Variant10基因組片斷的DNA質粒。
5.制備權利要求3或4所述試劑盒的方法，其特征在于，包括如下步驟：將用于檢測ROS1
融合基因變體Variant 1、Variant 9和Variant 10的正向引物、共用反向引物和熒光探針
的混合液作為熒光定量反應液A；將用于檢測ROS1融合基因變體Variant 2、Variant3、
Variant 5和Variant 6的正向引物、共用反向引物和熒光探針的混合液作為熒光定量反應
液B；將用于檢測ROS1融合基因變體Variant4、Variant 7和Variant 8的正向引物、共用反
向引物和熒光探針的混合液作為熒光定量反應液C；分別單獨包裝；
將分別包含ROS1融合基因變體Variant 1、Variant 9和Variant10基因組片斷的DNA質
粒作為陽性對照樣品A；將分別包含ROS1融合基因變體Variant 2、Variant 3、Variant 5和
Variant6基因組片斷的DNA質粒作為陽性對照樣品B；將分別包含ROS1融合基因變體
Variant 4、Variant 7和Variant8基因組片斷的DNA質粒作為陽性對照樣品C；分別單獨包
裝；
然后與熒光定量反應液預混液包裝于同一試劑盒中。
6.權利要求1-4任一項所述的試劑盒在制備檢測或輔助檢測ROS1融合基因變體的產品
中的應用。