本發明公開了一種檢測BYD病毒的環介導等溫擴增試劑盒及其應用。本發明提供的專用引物，包括引物1、引物2、引物3和引物4，所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4的核苷酸序列分別為序列表中的序列1、序列2、序列3、序列4。本發明的專用引物適用于對BYD病毒進行特異性檢測。本發明的優點：(1)只需在恒定溫度就能擴增反應，不需要特殊設備；(2)特異性高；(3)快速高效，擴增反應在35分鐘內即可完成；(4)靈敏度高；(5)鑒定方便簡單。

1.一種檢測BYD病毒的專用引物，包括由引物1、引物2、引物3、引物4和引
物5組成，所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的核苷酸序列分別為序
列表中的序列1、序列2、序列3和序列4；所述引物5的核苷酸序列為序列表的序列
5。
2.一種檢測BYD病毒的環介導等溫擴增試劑盒，包括RNA逆轉錄酶、Bst?DNA聚
合酶、2×環介導等溫擴增緩沖液、權利要求1所述的專用引物。
3.根據權利要求2所述的環介導等溫擴增試劑盒，其特征在于：
所述擴增試劑盒還包括鈣黃綠素；
所述擴增試劑盒由RNA逆轉錄酶、Bst?DNA聚合酶、2×環介導等溫擴增緩沖液、
權利要求1所述的專用引物和鈣黃綠素組成；
所述的專用引物中的引物1和引物2在所述環介導等溫擴增試劑中的終濃度為
5pmol/L；所述的專用引物中的引物3和引物4在所述環介導等溫擴增試劑中的終濃度
為40pmol/L；所述的專用引物中的引物5在所述環介導等溫擴增試劑中的終濃度為
20pmol/L；
所述RNA逆轉錄酶在所述環介導等溫擴增試劑中的濃度為0.004U/μL；
所述RNA逆轉錄酶具體為AMV逆轉錄酶；
所述Bst?DNA聚合酶在所述環介導等溫擴增試劑中的濃度為0.32U/μL；
所述鈣黃綠素在所述環介導等溫擴增試劑中的濃度為50μmol/L；
所述2×環介導等溫擴增緩沖液按照如下方法制備：將氯化鉀、硫酸鎂、硫酸銨、
吐溫20、甜菜堿、氯化錳和dNTPs溶于濃度為40mmol/L、PH值為8.8的Tris鹽酸
鹽緩沖液得到；
在所述2×環介導等溫擴增緩沖液中，所述氯化鉀的濃度為20mmol/L，所述硫酸
鎂的濃度為16mmol/L，所述硫酸銨的濃度為20mmol/L，所述吐溫20的濃度為0.2％
（質量百分含量），所述甜菜堿的濃度為1.6mol/L，所述氯化錳的濃度為1mmol/L，
每種所述dNTP的濃度均為2.8mmol/L。
4.權利要求11所述專用引物或權利要求2或3所述的環介導等溫擴增試劑3盒
在制備鑒定和/或輔助鑒定BYD病毒的產品中的應用；
所述BYD病毒為BYD病毒Byd1株。