本發明公開了一種用于檢測犬巴貝西蟲的引物組合、試劑盒及檢測方法，屬于生物檢測技術領域。本發明針對犬巴貝西蟲18s RNA基因序列設計套式PCR引物組合，引物特異性強，不受其他非目的基因的干擾，能快速、高效、準確定性犬巴貝西蟲的轉錄水平。本發明定性檢測犬巴貝西蟲的方法簡單、精確，可在4小時內準確檢測出最低為10拷貝的DNA樣本，檢測靈敏度高，同等實驗條件下對標準品的梯度檢測中套式PCR的靈敏度比普通PCR高出1000倍，實際臨床檢測中套式PCR的靈敏度比普通PCR高3～10個百分點。

1.一種用于檢測犬巴貝西蟲的引物組合，其特征在于：由外引物和內引物組成，外引物
為：
正向引物：5’-GGCTTTCGGTGATTCATA-3’，
反向引物：5’-CCTTCCGTCAATTCCTTT-3’；
內引物為：
正向引物：5’-TGGACCATTCAAGTTTCTG-3’，
反向引物：5’-TCGTCTTCGATCCCCTA-3’。
2.一種用于檢測犬巴貝西蟲的試劑盒，其特征在于：主要包括由外引物和內引物組成
的引物組合，外引物為：
正向引物：5’-GGCTTTCGGTGATTCATA-3’，
反向引物：5’-CCTTCCGTCAATTCCTTT-3’；
內引物為：
正向引物：5’-TGGACCATTCAAGTTTCTG-3’，
反向引物：5’-TCGTCTTCGATCCCCTA-3’。
3.根據權利要求2所述的用于檢測犬巴貝西蟲的試劑盒，其特征在于：還包括Taq酶、Mg^2
+、mix dNTP及緩沖液。
4.根據權利要求3所述的用于檢測犬巴貝西蟲的試劑盒，其特征在于：包括：Taq酶
100U、10×PCR Buffer 500μL、25mmol·L^-1Mg²⁺鹽500μL、10mmol·L^-1mix dNTP各100μL、
10pmol·μL^-1引物組合各100μL。