本發明涉及分子生物學技術領域，具體涉及一種自組裝聚HRP探針、制備方法、試劑盒及其應用。本發明自組裝聚HRP探針分子鏈中含有多個HRP，具有雙重信號放大功能，設計能夠與目標物和自組裝聚HRP探針結合的輔助探針，采用化學發光的原理對多種物質進行檢測，如蛋白質、DNA、RNA等。同時本發明將磁分離技術、自組裝聚HRP探針的雙重信號放大功能和化學發光檢測技術相結合，建立了一種靈敏度高、特異性強、操作簡便的方法并成功應用于血清中循環miR?142?3p的檢測。對于血清中miR?142?3p檢測結果表明T?ALL患者(n＝7)與健康人(n＝7)之間響應信號的差別具有統計學意義(P<0.05)。

1.一種自組裝聚HRP探針，其特征在于，由兩種DNA探針雜交而成，其中一種為標記辣根過氧化物酶的DNA探針，記為雜交探針1，其核苷酸序列為：5'-HRP-AAAAAAAAAATACTCCCCCAGGTGCCCCTCAGACCCTTTTAGT-3'；另一種DNA探針記為雜交探針2，其核苷酸序列為：5'-GCACCTGGGGGAGTAAAAACTAAAAGGGTCTGAGGG-3'。2.一種如權利要求1所述的自組裝聚HRP探針的制備方法，其特征在于，取雜交探針1和雜交探針2，在室溫環境下渦旋雜交，即完成。3.一種試劑盒，其特征在于，包括用于捕獲目標物的捕獲探針、輔助探針和如權利要求1所述的自組裝聚HRP探針；其中輔助探針的核苷酸序列從5'端到3'端包括與目標物特異性結合的序列1、與自組裝聚HRP探針互補結合的序列2。4.如權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，還包括目標物捕獲載體、化學發光板、洗滌液、雜交緩沖液、化學發光底液。5.一種如權利要求3或4所述的試劑盒的應用，其特征在于，應用于檢測RNA、DNA和蛋白質。6.如權利要求5所述的試劑盒的應用，其特征在于，應用于檢測miR-142-3p。7.如權利要求6所述的試劑盒的應用，其特征在于，所述捕獲探針的核苷酸序列為5'-AAAAAAAAAATCCATAAAGTAG-3'；輔助探針的核苷酸序列為5'-GAAACACTACAACTAAAAGGGTCTGAGGG-3'。8.如權利要求6或7所述的試劑盒的應用，其特征在于，所述目標物捕獲載體為鏈霉親和素磁珠；所述捕獲探針負載在鏈霉親和素磁珠上，記為C-DNA-MNPs。9.如權利要求6所述的試劑盒的應用，其特征在于，用于檢測血清樣品中miR-142-3P，所述試劑盒還包括裂解液，所述裂解液中含有10～1000μg/ml蛋白酶K和質量體積百分含量為0.1～10％的SDS，pH＝7.4。10.如權利要求8所述的試劑盒的應用，其特征在于，其檢測方法包括以下操作步驟：(1)洗滌化學發光板：采用洗滌液清洗化學發光板；(2)加C-DNA-MNPs：用雜交緩沖液洗滌懸浮于免疫磁珠保存液的C-DNA-MNPs 3次，并重懸于相同體積雜交緩沖液中，每孔1～90μL加入化學發光板中，用洗滌液洗板；(3)加待檢測樣品：在步驟(2)處理后的化學發光板中加入一定體積的待檢測樣品，溫育，磁分離，棄上清，用洗滌液洗板；(4)在化學發光板每孔中加入輔助探針，25℃溫度下溫育20min，然后加入自組裝聚HRP探針，溫育，然后磁分離，棄上清，用洗滌液洗板3次；(5)在化學發光板每孔中加入化學發光底液，用微孔板式發光檢測儀檢測RLU；(6)按照上述步驟(1)至(5)同樣的方法檢測不同濃度的miR-142-3P標準品的RLU，繪制出RLU與miR-142-3P濃度之間關系的標準曲線圖，得出RLU與miR-142-3P濃度之間的關系式，然后將步驟(5)中檢測的待檢測樣品的RLU帶入該關系式，即可計算出待檢測樣品中miR-142-3P的濃度。