本發明提供了用于構建血漿DNA測序文庫的方法，包括以下步驟：1)抽提血漿DNA；2)任選將血漿DNA進行末端補平，獲得末端補平后的血漿DNA；3)將任選末端補平后的血漿DNA進行3’懸A，獲得3’懸A后的血漿DNA；4)將3’懸A后的血漿DNA與測序接頭連接，獲得連接產物；5)對連接產物進行純化，獲得純化產物。本發明也提供用于構建血漿DNA測序文庫的試劑盒。本發明大大簡化了血漿DNA測序文庫的構建流程，除去了由于PCR擴增造成的環境以及樣本間的污染，降低了血漿DNA文庫構建對環境的要求，同時也除去了由于PCR過程造成的基因組覆蓋的不均一性，使得血漿樣本文庫構建更加低成本、高效、快速，血漿DNA測序結果更加真實、有效。

1.用于第二代高通量測序平臺的血漿DNA測序文庫的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：1)抽提得到小于10ng的血漿DNA；2)將血漿DNA進行末端補平，獲得末端補平后的血漿DNA；3)將末端補平后的血漿DNA進行3’懸A，獲得3’懸A后的血漿DNA；4)將3’懸A后的血漿DNA與測序接頭連接，獲得連接產物；5)對連接產物進行純化，獲得純化產物，其中所述純化產物不需PCR擴增反應步驟即可獲得所述血漿DNA測序文庫，其中所述步驟2)和3)在一個反應體系中進行，中間沒有純化步驟。2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)通過選自以下的一種或兩種酶來進行：T4 DNA連接酶和T7 DNA連接酶。3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述測序接頭為雙鏈的測序接頭。4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述3’懸A采用klenow ex-酶、Taq酶、或klenow ex-酶與Taq酶的組合。5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟2)采用T4 DNA聚合酶進行；且所述步驟3)采用Taq酶進行。6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟3)和4)之間進行純化步驟；或步驟2)、3)和4)在一個反應體系中進行，中間沒有純化步驟。7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟2)采用T4 DNA聚合酶進行；所述步驟3)采用Taq酶進行；且所述步驟4)采用T4 DNA連接酶和T7 DNA連接酶進行。8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述第二代高通量測序平臺選自Roche/454FLX、Illumina/Hiseq、Miseq和Life Technologies/SOLID system、PGM或Proton。