本發明提供一種細胞壽命延長及成血管能力增強的人干細胞的制備方法，其中，所述方法包括構建RNA睪丸信號轉導與激活子和血管生成素?1的基因片段，重組到病毒表達載體上，轉染人干細胞可延長細胞的壽命，并提高人干細胞的成血管能力，且無成瘤性；本發明還提供了延長細胞壽命和成血管能力的人干細胞的試劑盒，該人干細胞將有望對缺血性心腦血管疾病的達到較好的治療效果。

1.一種細胞壽命延長及成血管能力增強的人骨髓間充質干細胞(hBMSCs)的制備方法，其特征在于，將T-STAR和Angl序列通過PCR從正常人外周血基因組DNA中擴增下來，將T-STAR和Angl分別經PacI/AscI雙酶切后，分別得到雙酶切后的T-STAR和Angl，pLenti6.3_MCS載體經PacI/AscI雙酶切后，將所述雙酶切后的T-STAR、Angl分別與雙酶切后的載體在T4DNA連接酶作用下，于4℃、12小時連接反應制備克隆連接液，轉化大腸桿菌感受態細胞DH5a后進行陽性克隆PCR鑒定和測序鑒定，得到慢病毒表達質粒；取細胞狀態良好，處于對數生長期的293T細胞，細胞計數后，按照每個直徑為10cm的培養皿6×10⁶個細胞數接種于培養皿中，37℃，5％CO₂的培養箱中培養過夜；第二天轉染前移去培養液，換5ml Opti-MEM培養液；取9μg Packaging Mix和3μg慢病毒表達質粒加入1.5mlOpti-MEM中，輕輕混勻，得到質粒溶液，取36μl lipofectamine2000加入1.5ml Opti-MEM中，輕輕混勻，室溫放置5min，得到lipofectamine2000稀釋液；混合質粒溶液和lipofectamine 2000稀釋液，置室溫20min，得到質粒脂質體復合物；將3ml質粒脂質體復合物加入到293T細胞培養皿中，混勻，37℃、5％CO₂的培養箱中孵育6個小時后，更換完全培養液DMEM，獲得轉染后的293T細胞；48h后收集細胞培養上清，3000rpm離心10min，去除細胞和碎片，并用0.45μm的濾器過濾；將病毒原液在50000g下超速離心2小時，去除上清，重懸于opti-MEM培養液中，滴度測定后分裝成小管保存于-80℃，轉染人骨髓間充質干細胞；通過熒光定量PCR試劑盒按照使用說明書檢測，轉染了T-STAR和Angl雙病毒載體的hBMSCs傳代培養到第10代后，其表達T-STAR和Angl基因均高于未轉染的hBMSCs，分別為27.8和20.7倍。2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，重組T-STAR和Angl雙慢病毒載體轉染的hBMSCs通過完全培養液DMEM體外傳代培養，當細胞培養到第5-6天，細胞生長融合達到90％以上，需要使用質量體積比為0.25％的胰酶消化傳代。3.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，通過瑞士羅氏公司TeloTAGGG端粒酶PCR ELISAPLUS試劑盒檢測，取傳代培養獲得第10代轉染了重組T-STAR和Angl雙慢病毒載體的hBMSCs，根據使用說明書檢測其相對端粒酶活性。