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大腸癌紡錘體組裝檢驗點檢測用試劑體系和試劑盒及應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-07-26
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201610948658.4 
  • 技術(專利)名稱 大腸癌紡錘體組裝檢驗點檢測用試劑體系和試劑盒及應用 
  • 項目單位 劉鵬飛
  • 發明人 劉鵬飛,王菁蕊,韓雪 
  • 行業類別 醫藥制造-生物藥品
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 李玫雯
  • 發布時間 2021-07-26  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及用于大腸癌紡錘體組裝檢驗點靶點基因檢測的試劑體系和試劑盒及其應用。所述試劑包括用于BubR1基因檢測的試劑,用于Mad1基因檢測的試劑,用于Mad2基因檢測的試劑,用于AURKB基因檢測的試劑,用于PlK1基因檢測的試劑和用于Cdc20基因檢測的試劑。本發明利用專一性設計的探針和PCR擴增技術,經過DNA特異性結合反應,一次性對有絲分裂過程末期紡錘體組裝檢驗點相關6個基因的表達狀態進行檢測,填補了紡錘體組裝檢驗點相關基因的大腸癌檢測空白。檢測結果全面可靠,且快速高效、操作簡單、靈敏度高、特異性強,誤診率低,能夠在早期及時對大腸癌的發生和發展進行精準診斷。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種大腸癌紡錘體組裝檢驗點用試劑體系,其特征在于,所述試劑體系包括用于BubR1基因檢測的試劑,用于Mad1基因檢測的試劑,用于Mad2基因檢測的試劑,用于AURKB基因檢測的試劑,用于PlK1基因檢測的試劑和用于Cdc20基因檢測的試劑,所述用于BubR1基因檢測的試劑包括用于BubR1檢測的DNA探針,其序列如SEQ IDNO.13所示;所述用于Mad1基因檢測的試劑包括用于Mad1檢測的DNA探針,其序列如SEQ ID NO.14所示;所述用于Mad2基因檢測的試劑包括用于Mad2檢測的DNA探針,其序列如SEQ ID NO.15所示;所述用于AURKB基因檢測的試劑包括用于AURKB檢測的DNA探針,其序列如SEQ IDNO.16所示;所述用于PlK1基因檢測的試劑包括用于PlK1檢測的DNA探針,其序列如SEQ ID NO.17所示;所述用于Cdc20基因檢測的試劑包括用于Cdc20檢測的DNA探針,其序列如SEQ IDNO.18所示。2.根據權利要求1所述的試劑體系,其特征在于,所述用于BubR1基因檢測的試劑包括如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的擴增引物;所述用于Mad1基因檢測的試劑包括如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的擴增引物;所述用于Mad2基因檢測的試劑包括如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的擴增引物;所述用于AURKB基因檢測的試劑包括如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示的擴增引物;所述用于PlK1基因檢測的試劑包括如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的擴增引物;所述用于Cdc20基因檢測的試劑包括如SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示的擴增引物。3.一種用于大腸癌紡錘體組裝檢驗點靶點基因檢測的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括用于BubR1基因檢測的試劑,用于Mad1基因檢測的試劑,用于Mad2基因檢測的試劑,用于AURKB基因檢測的試劑,用于PlK1基因檢測的試劑和用于Cdc20基因檢測的試劑,所述用于BubR1基因檢測的試劑包括用于BubR1檢測的DNA探針,其序列如SEQ IDNO.13所示;所述用于Mad1基因檢測的試劑包括用于Mad1檢測的DNA探針,其序列如SEQ ID NO.14所示;所述用于Mad2基因檢測的試劑包括用于Mad2檢測的DNA探針,其序列如SEQ ID NO.15所示;所述用于AURKB基因檢測的試劑包括用于AURKB檢測的DNA探針,其序列如SEQ IDNO.16所示;所述用于PlK1基因檢測的試劑包括用于PlK1檢測的DNA探針,其序列如SEQ ID NO.17所示;所述用于Cdc20基因檢測的試劑包括用于Cdc20檢測的DNA探針,其序列如SEQ IDNO.18所示。4.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,包括用于BubR1基因的擴增引物,序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;用于Mad1基因的擴增引物,序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示;用于Mad2基因的擴增引物,序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示;用于AURKB基因的擴增引物,序列如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示;用于PlK1基因的擴增引物,序列如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示;用于Cdc20基因的擴增引物,序列如SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示。5.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中的試劑包括樣品DNA提取組件、PCR擴增組件、PCR產物純化組件和DNA測序反應組件。6.根據權利要求4所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中的試劑包括樣品DNA提取組件、PCR擴增組件、PCR產物純化組件和DNA測序反應組件。7.根據權利要求5所述的試劑盒,其特征在于,所述PCR產物純化組件包括ddH2O、SAP酶和ExoI酶。8.根據權利要求6所述的試劑盒,其特征在于,所述PCR產物純化組件包括ddH2O、SAP酶和ExoI酶。9.根據權利要求5所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中DNA測序反應組件包括ddH2O、EDTA溶液、乙醇溶液、去離子甲酰胺溶液和BigDye mix試劑。10.根據權利要求6所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中DNA測序反應組件包括ddH2O、EDTA溶液、乙醇溶液、去離子甲酰胺溶液和BigDye mix試劑。11.根據權利要求7所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中DNA測序反應組件包括ddH2O、EDTA溶液、乙醇溶液、去離子甲酰胺溶液和BigDye mix試劑。12.根據權利要求8所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中DNA測序反應組件包括ddH2O、EDTA溶液、乙醇溶液、去離子甲酰胺溶液和BigDye mix試劑。13.根據權利要求5所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中的樣品DNA提取組件包括糞便裂解液、硅膠膜結合液、硅膠膜洗滌液和蛋白沉淀液。14.根據權利要求6所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中的樣品DNA提取組件包括糞便裂解液、硅膠膜結合液、硅膠膜洗滌液和蛋白沉淀液。15.根據權利要求7所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中的樣品DNA提取組件包括糞便裂解液、硅膠膜結合液、硅膠膜洗滌液和蛋白沉淀液。16.根據權利要求8所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中的樣品DNA提取組件包括糞便裂解液、硅膠膜結合液、硅膠膜洗滌液和蛋白沉淀液。17.根據權利要求9所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中的樣品DNA提取組件包括糞便裂解液、硅膠膜結合液、硅膠膜洗滌液和蛋白沉淀液。18.根據權利要求10所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中的樣品DNA提取組件包括糞便裂解液、硅膠膜結合液、硅膠膜洗滌液和蛋白沉淀液。19.根據權利要求11所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中的樣品DNA提取組件包括糞便裂解液、硅膠膜結合液、硅膠膜洗滌液和蛋白沉淀液。20.根據權利要求12所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中的樣品DNA提取組件包括糞便裂解液、硅膠膜結合液、硅膠膜洗滌液和蛋白沉淀液。21.根據權利要求13所述的試劑盒,其特征在于,所述糞便裂解液包括:30-100mmol/LTris-Cl、3-10mmol/L EDTA、0.6-5mmol/L NaCl和0.1-1.0%(W/V)十二烷基硫酸鈉。22.根據權利要求14所述的試劑盒,其特征在于,所述糞便裂解液包括:30-100mmol/LTris-Cl、3-10mmol/L EDTA、0.6-5mmol/L NaCl和0.1-1.0%(W/V)十二烷基硫酸鈉。23.根據權利要求15所述的試劑盒,其特征在于,所述糞便裂解液包括:30-100mmol/LTris-Cl、3-10mmol/L EDTA、0.6-5mmol/L NaCl和0.1-1.0%(W/V)十二烷基硫酸鈉。24.根據權利要求16所述的試劑盒,其特征在于,所述糞便裂解液包括:30-100mmol/LTris-Cl、3-10mmol/L EDTA、0.6-5mmol/L NaCl和0.1-1.0%(W/V)十二烷基硫酸鈉。25.根據權利要求17所述的試劑盒,其特征在于,所述糞便裂解液包括:30-100mmol/LTris-Cl、3-10mmol/L EDTA、0.6-5mmol/L NaCl和0.1-1.0%(W/V)十二烷基硫酸鈉。26.根據權利要求18所述的試劑盒,其特征在于,所述糞便裂解液包括:30-100mmol/LTris-Cl、3-10mmol/L EDTA、0.6-5mmol/L NaCl和0.1-1.0%(W/V)十二烷基硫酸鈉。27.根據權利要求19所述的試劑盒,其特征在于,所述糞便裂解液包括:30-100mmol/LTris-Cl、3-10mmol/L EDTA、0.6-5mmol/L NaCl和0.1-1.0%(W/V)十二烷基硫酸鈉。28.根據權利要求20所述的試劑盒,其特征在于,所述糞便裂解液包括:30-100mmol/LTris-Cl、3-10mmol/L EDTA、0.6-5mmol/L NaCl和0.1-1.0%(W/V)十二烷基硫酸鈉。29.根據權利要求13-28任一項所述的試劑盒,其特征在于,所述硅膠膜結合液包括3-10mol/L鹽酸胍。30.根據權利要求13-28任一項所述的試劑盒,其特征在于,所述硅膠膜洗滌液包括:1-5mmol/L Tris-Cl、0.5-2mmol/L EDTA、1-5mmol/L NaCl和體積含量為30-50%的乙醇。31.根據權利要求29所述的試劑盒,其特征在于,所述硅膠膜洗滌液包括:1-5mmol/LTris-Cl、0.5-2mmol/L EDTA、1-5mmol/L NaCl和體積含量為30-50%的乙醇。32.根據權利要求13-28任一項所述的試劑盒,其特征在于,所述蛋白沉淀液包括:0.5-2mol/L乙酸鉀和體積含量為5-20%冰乙酸。33.根據權利要求29所述的試劑盒,其特征在于,所述蛋白沉淀液包括:0.5-2mol/L乙酸鉀和體積含量為5-20%冰乙酸。34.根據權利要求30所述的試劑盒,其特征在于,所述蛋白沉淀液包括:0.5-2mol/L乙酸鉀和體積含量為5-20%冰乙酸。35.根據權利要求31所述的試劑盒,其特征在于,所述蛋白沉淀液包括:0.5-2mol/L乙酸鉀和體積含量為5-20%冰乙酸。36.用于BubR1基因檢測的試劑、用于Mad1基因檢測的試劑、用于Mad2基因檢測的試劑、用于AURKB基因檢測的試劑、用于PlK1基因檢測的試劑和用于Cdc20基因檢測的試劑在制備檢測大腸癌紡錘體組裝檢驗點的試劑體系和試劑盒中的應用,其特征在于,所述用于BubR1基因檢測的試劑包括用于BubR1檢測的DNA探針,其序列如SEQ IDNO.13所示;所述用于Mad1基因檢測的試劑包括用于Mad1檢測的DNA探針,其序列如SEQ ID NO.14所示;所述用于Mad2基因檢測的試劑包括用于Mad2檢測的DNA探針,其序列如SEQ ID NO.15所示;所述用于AURKB基因檢測的試劑包括用于AURKB檢測的DNA探針,其序列如SEQ IDNO.16所示;所述用于PlK1基因檢測的試劑包括用于PlK1檢測的DNA探針,其序列如SEQ ID NO.17所示;所述用于Cdc20基因檢測的試劑包括用于Cdc20檢測的DNA探針,其序列如SEQ IDNO.18所示。37.根據權利要求36所述的應用,其特征在于,所述試劑包括PCR擴增用試劑、限制性內切酶酶切用試劑、PCR產物純化用試劑。38.根據權利要求36或37所述的應用,其特征在于,所述試劑的作用對象為糞便。
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