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1型和3型鴨甲肝病毒一步法雙重RT-PCR檢測試劑盒、引物對及方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-15
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310228262.9 
  • 技術(專利)名稱 1型和3型鴨甲肝病毒一步法雙重RT-PCR檢測試劑盒、引物對及方法 
  • 項目單位 四川農業大學
  • 發明人 程安春,文興建,汪銘書,朱德康,陳孝躍 
  • 行業類別 藥品-化學藥品
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 衛正昊
  • 發布時間 2021-12-15  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開的是1型和3型鴨甲肝病毒一步法雙重RT-PCR檢測試劑盒、引物對及方法,引物對1由引物1和引物2組成,用于檢測1型鴨甲肝病毒,它們的核苷酸序列分別依次為SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的單鏈DNA;引物對2由引物3和引物4組成,用于檢測3型鴨甲肝病毒,它們的核苷酸序列分別依次為SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的單鏈DNA。一次RT-PCR反應就能同時檢測1型鴨甲肝病毒和3型鴨甲肝病毒兩種病原體的檢測技術,避免了常規PCR的重復檢測,具有低成本、高效率等優點,而且在引物設計上利用擴增片段長度的不同直接判定擴增結果,使得該方法在結果判定時更簡便、直觀和實用。
    展開
  • 02

    說明書

    1.能夠檢測1型鴨甲肝病毒和3型鴨甲肝病毒的兩個引物對,其特征
    在于,引物對1由引物1和引物2組成,用于檢測1型鴨甲肝病毒,它們的核苷
    酸序列分別依次為SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:2所示的單鏈DNA;引物
    對2由引物3和引物4組成,用于檢測3型鴨甲肝病毒,它們的核苷酸序列分別
    依次為SEQ?ID?NO:3和SEQ?ID?NO:4所示的單鏈DNA。
    2.1型鴨甲肝病毒和3型鴨甲肝病毒一步法雙重RT-PCR檢測試劑盒,
    其特征在于,在本試劑盒中包括彼此獨立分裝的以下各組分:

    其中PrimeScript?1?Step?Enzyme?Mix由RTase、
    HS、RNase?Inhibitor以及One?Step?RT-PCR用穩定劑配制,2×1Step?Buffer由
    Buffer、dNTP以及One?Step?Enhancer?Solution配制,具體配比參照寶生物工程(大
    連)有限公司的One?Step?RT-PCR?Kit?Ver.2(Dye?Plus),上述劑量為
    100次量。
    3.應用權利要求2所述檢測試劑盒檢測1型鴨甲肝病毒和3型鴨甲肝
    病毒的多重PCR檢測方法,其特征在于,用于非診斷性目的的檢測,引物1在
    所述PCR試劑中的終濃度具體為0.2umol/L;引物2在所述PCR試劑中的終
    濃度具體為0.2umol/L;引物3在所述PCR試劑中的終濃度具體為0.4umol/L;
    引物4在所述PCR試劑中的終濃度具體為0.4umol/L;RT-PCR的反應條件為
    50℃反轉錄30分鐘,94℃變性2分鐘;然后進入變性94℃30秒,45℃梯度退
    火20秒,每循環一次升高2℃,72℃延伸2分鐘的循環,共進行8個循環;
    然后進入變性94℃30秒,55℃退火20秒,72℃延伸2分鐘的循環,共進行
    25個循環;最后再經72℃延伸10分鐘后,于4℃結束反應。
    展開

專利技術附圖

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