本發(fā)明涉及基因C9ORF135的應(yīng)用，具體講涉及基因C9ORF135、其編碼的蛋白以及該蛋白的抗體的應(yīng)用及其試劑盒。本發(fā)明提出基因C9ORF135、其編碼的蛋白以及該蛋白的抗體在診斷、檢測(cè)或治療精子畸形中的應(yīng)用，在作為男性避孕藥的潛在靶點(diǎn)中的應(yīng)用、在診斷、檢測(cè)或治療衰老引起的精子活力下降及精子畸形中的應(yīng)用，以及在檢測(cè)胚胎干細(xì)胞分化中的應(yīng)用，本發(fā)明還提出用于檢測(cè)精子畸形的試劑盒、用于篩選男性避孕藥物的試劑盒、用于檢測(cè)胚胎干細(xì)胞分化的試劑盒及其使用方法。

1.一種用于診斷或檢測(cè)精子畸形的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒為定量PCR的試劑盒，
含有：提取精子RNA的試劑盒、正常參比組的RNA、逆轉(zhuǎn)錄試劑、C9ORF135基因的引物
、內(nèi)參的引物，SYBR熒光試劑盒，所述內(nèi)參采用魚精蛋白1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的C9ORF135基因前引物的核苷酸序列如
SEQ?ID?NO:1所示，C9ORF135基因后引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示；魚精蛋白1
前引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:3所示，魚精蛋白1后引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:4
所示。
3.一種用于診斷或檢測(cè)精子畸形的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒采用免疫檢測(cè)法，含有
：提取精子蛋白質(zhì)的試劑盒、C9ORF135抗體包被的孔板、C9ORF135的單克隆或多克隆抗
體、作為濃度參比標(biāo)準(zhǔn)的C9ORF135純化蛋白、第二抗體、ELISA顯色試劑，用于檢測(cè)的酶
標(biāo)儀，其中，C9ORF135抗體為單抗或多抗。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒中的C9ORF135的單克隆或多克
隆抗體為兔源，所述的第二抗體選自辣根過氧化物酶羊抗兔IgG。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的使用方法為：將C9ORF135抗體
包被的96孔板，加入提取的精子蛋白質(zhì)，再加入C9ORF135抗體混合，溫育，洗去非特異性
吸附的蛋白，加入二抗和顯色劑；用原核表達(dá)的C9ORF135蛋白作為參考的標(biāo)準(zhǔn)品，按濃度
從高到低倍比稀釋，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；通過測(cè)定待測(cè)精子蛋白質(zhì)的吸光度，計(jì)算其含量；其
中，C9ORF135抗體為單抗或多抗。
6.基因C9ORF135所編碼蛋白的抗體在檢測(cè)胚胎干細(xì)胞分化中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的檢測(cè)方法包括定量PCR檢測(cè)法、ELISA免
疫檢測(cè)法。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，當(dāng)采用定量PCR檢測(cè)法時(shí)，當(dāng)待測(cè)組的基因
C9ORF135的水平不低于胚胎干細(xì)胞組50%時(shí)，判定為未分化；當(dāng)采用免疫檢測(cè)法時(shí)，當(dāng)待
測(cè)組的基因C9ORF135編碼的蛋白質(zhì)的水平不低于胚胎干細(xì)胞組50%時(shí)，判定為未分化。
9.一種用于檢測(cè)胚胎干細(xì)胞分化的試劑盒，所述試劑盒含有：RNA提取試劑盒、正常參比
組的RNA、逆轉(zhuǎn)錄試劑、C9ORF135基因的引物、內(nèi)參的引物、SYBR熒光試劑盒，所述
內(nèi)參采用GAPDH。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述的C9ORF135基因前引物的核苷酸序
列如SEQ?ID?NO:1所示，C9ORF135基因后引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示；內(nèi)
參GAPDH前引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:5所示，后引物的核苷酸序列如SEQ?ID
NO:6所示。
11.一種用于檢測(cè)胚胎干細(xì)胞分化的試劑盒，所述試劑盒含有：蛋白質(zhì)提取試劑盒、C9ORF135
抗體包被的96孔板、C9ORF135的單克隆或多克隆抗體、作為濃度參比標(biāo)準(zhǔn)的C9ORF135純
化蛋白、第二抗體、ELISA顯色試劑，用于檢測(cè)的酶標(biāo)儀，其中，C9ORF135抗體為單抗或
多抗。