本發明公開了一種甘蔗線條花葉病毒RT?LAMP引物組、檢測方法及其應用，本發明采用環介導等溫擴增(LAMP)技術，并根據甘蔗線條花葉病毒的CP基因序列設計了相應的RT?LAMP檢測引物組，包括外側引物對F3和B3、內側引物對FIP和BIP，并由此發明了用于檢測甘蔗線條花葉病毒的RT?LAMP檢測方法及試劑盒。本發明甘蔗線條花葉病毒的RT?LAMP檢測方法及試劑盒可快速、準確、簡便地進行病害鑒定，進而采取適當的防治措施，減少病害帶來的損失。

1.甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測引物組，其特征在于：包括外側引物對F3和B3、內側
引物對FIP和BIP，其分別是為SEQ ID No.1至SEQ ID No.4所示的序列。
2.一種甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測方法，其特征在于：利用RT-LAMP檢測引物組，在
63℃恒溫反應條件下，進行環介導恒溫擴增反應60min，擴增完成后80℃再反應5min，然后
利用瓊脂糖凝膠電泳或熒光染色，鑒定植株樣品是否感染甘蔗線條花葉病毒；所述的RT-
LAMP檢測引物組包括外側引物對F3和B3、內側引物對FIP和BIP，其分別是為SEQ ID No.1至
SEQ ID No.4所示的序列。
3.根據權利要求2所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測方法，其特征在于：所述的外
側引物對、內側引物對的濃度比為1:4。
4.根據權利要求2或3所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測方法，其特征在于：所述的
外側引物對、內側引物對的濃度分別為0.2μM和0.8μM。
5.一種甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測試劑盒，其特征在于：包括A試液、B試液和C試
液；所述的A試液為LAMP反應體系，其中含有RT-LAMP buffer、MMLV-Bst混合液、RNase
Inhibitor、RNase-Free Water和RT-LAMP檢測引物組；所述的B試液含甘蔗線條花葉病毒
RNA；所述的C試液為RNase free Water；所述的RT-LAMP檢測引物組，包括外側引物對F3和
B3、內側引物對FIP和BIP，其分別是為SEQ ID No.1至SEQ ID No.4所示的序列。
6.根據權利要求5所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述的A
試液中含RT-LAMP buffer 4μL、MMLV-Bst混合液1.5μL、RNase-Free Water 11.5μL、RNase
Inhibitor 1μL、RT-LAMP檢測引物組5μL，其中F3和B3引物各0.5μL，終濃度均為0.2μM；FIP
和BIP引物各2μL，終濃度均為0.8μM；所述的引物F3、B3、FIP和BIP分別是為SEQ ID No.1至
SEQ ID No.4所示的序列。
7.根據權利要求5或6所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述
的B試液作為陽性對照；所述的C試液作為陰性對照。
8.根據權利要求1所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測引物組、權利要求2所述的甘
蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測方法或權利要求5所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測試劑
盒在感病甘蔗上檢測甘蔗線條花葉病毒的應用。