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一種胃癌類器官的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-12-05
  • 技術(shù)成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN202010323731.5 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種胃癌類器官的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法 
  • 項目單位 創(chuàng)芯國際生物科技(廣州)有限公司
  • 發(fā)明人 王哲君,李剛,徐叢 
  • 行業(yè)類別 醫(yī)藥制造-藥用輔料
  • 技術(shù)成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 楊海頤
  • 發(fā)布時間 2021-12-05  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明提供一種胃癌類器官的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法,該培養(yǎng)基包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基1640、特異性添加因子和無菌水;其中,所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基1640和所述無菌水的質(zhì)量比為:99:1;所述特異性添加因子包括:不含維生素A的B27、N?acetylcysteine、EGF、Noggin、R?spondin 1、Wnt3a、CHIR99021、thiazovivin、Gastrin I、丙戊酸、青霉素鏈霉素混合液、兩性霉素B、Primocin。采用該培養(yǎng)基進行胃癌類器官的培養(yǎng),能夠維持原發(fā)組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)和基因特征,有效降低胃癌培養(yǎng)中的微生物污染風(fēng)險,提高胃癌類器官培養(yǎng)的成功率和存活率。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種胃癌類器官的培養(yǎng)基,其特征在于:由基礎(chǔ)培養(yǎng)基1640、特異性添加因子和無菌水組成;所述培養(yǎng)基的pH為4.5-6.0;其中,所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基1640和所述無菌水的質(zhì)量比為:99:1;所述特異性添加因子由以下組分構(gòu)成:不含維生素A的B27,1-5×;N-acetylcysteine,0.2-5μM;EGF,10-100ng/ml;Noggin,20-500ng/ml;R-spondin 1,100-1000ng/ml;Wnt3a,50-200ng/ml;CHIR99021,1-10μM;thiazovivin,0.5-5μM;GastrinI,5-50ng/ml;丙戊酸,0.2-5mM;青霉素鏈霉素混合液,0.8-2×;兩性霉素B,0.5-5μg/ml;Primocin,0.5-5mg/ml;上述特異性添加因子各組分的濃度均以其在基礎(chǔ)培養(yǎng)基和無菌水的混合液中的濃度為準(zhǔn)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種胃癌類器官的培養(yǎng)基,其特征在于:所述培養(yǎng)基包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基1640、特異性添加因子和無菌水組成;其中,所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基1640和所述無菌水的質(zhì)量比為:99:1;所述特異性添加因子由以下組分構(gòu)成:不含維生素A的B27,1-2×;N-acetylcysteine,1-2μM;EGF,50-80ng/ml;Noggin,100-200ng/ml;R-spondin 1,200-500ng/ml;Wnt3a,100-150ng/ml;CHIR99021,5μM;thiazovivin,2μM;GastrinI,20-30ng/ml;丙戊酸,1-4mM;青霉素鏈霉素混合液,1×;兩性霉素B,2μg/ml;Primocin,2mg/ml。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種胃癌類器官的培養(yǎng)基,其特征在于:所述培養(yǎng)基的制備方法為:將特異性添加因子用無菌水配制成混合母液,然后加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基1640中既得。4.一種胃癌類器官的培養(yǎng)方法,其特征在于:包括以下步驟:1)將新鮮來源為胃癌的手術(shù)切除標(biāo)本或活檢組織進行預(yù)處理,得到細(xì)胞數(shù)量為3-50個細(xì)胞的細(xì)胞團后,離心去除上清,細(xì)胞團沉淀備用;2)將權(quán)利要求1~3任意一項所述的培養(yǎng)基與基質(zhì)膠混合均勻后重懸步驟1)得到的細(xì)胞團沉淀,獲得混有細(xì)胞的凝膠,將該凝膠接種;3)待步驟2)的接種凝膠充分凝固后加入上述培養(yǎng)基,并于37℃、5%CO2濃度下培養(yǎng);4)每隔2-3天更換一次權(quán)利要求1~3任意一項所述的培養(yǎng)基,培養(yǎng)4-10天,得到胃癌類器官。
    展開

專利技術(shù)附圖

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