本發明提供了一種優化的無血清細胞培養基，所述培養基由基礎培養基和添加物組成，其中添加物是終濃度為2～5mM的谷氨酸和4mM的谷氨酰胺。以及該細胞培養基在生產治療性重組蛋白(如人II型腫瘤壞死因子受體?抗體融合蛋白(rhTNFRII?Fc))和/或抗體(如CD20單克隆抗體)藥物的哺乳動物細胞培養中的應用。使用該優化培養基培養哺乳動物細胞可減少細胞生產培養過程中所產生的代謝副產物(如銨離子)對所述動物細胞生長狀態和功能的影響，以及保證所述重組蛋白或抗體的性質和產量。

1.一種細胞培養基，所述細胞為中國倉鼠卵巢(CHO)細胞，其特征在于，所述培養基由
基礎培養基和添加物組成，其中添加物為谷氨酸和谷氨酰胺，所述添加物谷氨酸終濃度為2
～5mM，所述添加物谷氨酰胺終濃度為4mM。
2.如權利要求1所述的細胞培養基，其特征在于，所述基礎培養基具有如下特征：
(1)無血清、無動物源成分；
(2)用于哺乳動物細胞大規模培養；
(3)谷氨酸含量低于2mmol/L，不含谷氨酰胺。
3.如權利要求1所述的細胞培養基，其特征在于，所述基礎培養基選自下述一種或多種
商用培養基：EX-CELL302 CHO Serum-Free Medium、EX-CELL325 PF CHO、EX-XELL CD
Fusion、SFM4CHO、CDM4CHO、Hycell CHO Medium、CDM4Mab。
4.一種哺乳動物細胞的培養方法，所述哺乳動物細胞為中國倉鼠卵巢(CHO)細胞，其特
征在于，在生產培養過程中使用權利要求1-3中任一權利要求所述的細胞培養基。
5.如權利要求4所述哺乳動物細胞的培養方法，其特征在于，7.5L生物反應器流加培養
階段，培養條件是37℃，溶氧50％，pH7.0，培養體積為3L，在培養過程中不再額外補充氮源，
所述氮源為谷氨酰胺；當細胞密度達到2×10⁶cells/mL接種至7.5L生物反應器中進行生產
培養，并添加適量補料培養基Feed A、Feed B和葡萄糖。
6.如權利要求4或5所述的哺乳動物細胞的培養方法，其特征在于，所述的中國倉鼠卵
巢(CHO)細胞是DHFR缺陷型的CHO工程細胞株。
7.生產重組蛋白質或抗體的方法，其特征在于，包括使用權利要求4-6任一權利要求所
述的方法培養產生所述哺乳動物細胞，所述哺乳動物細胞為中國倉鼠卵巢(CHO)細胞，和從
培養基中回收所述的重組蛋白質或抗體。
8.如權利要求7所述的生產重組蛋白質或抗體的方法，其特征在于，所述的重組蛋白選
自人II型腫瘤壞死因子受體-抗體融合蛋白(rhTNFRII-Fc)，所述的抗體選自抗CD20單克隆
抗體。