1.油茶品種‘華碩’的組織培養快速繁殖方法,包括外植體消
毒、初代培養、繼代增殖培養、生根培養和移栽的步驟,其特征在于,
外植體消毒具體為:取油茶新梢抽出5-10cm,葉片數4-6片的枝
條作為外植體,用水沖洗8-15min,然后浸泡于75%酒精中10-60s,
用水沖洗后,再用0.1%HgCl2處理2-4min,最后用無菌水沖洗3-5遍;
初代培養具體為:將消毒好的外植體接入初代培養基中,暗培養
1-3d后,在光照條件下培養20-25d,培養溫度為26±1℃;所述初代
培養基為:MS+1-4mg/L6-BA+0.05-0.2mg/L?IAA+30g/L蔗糖+7-10g/L
瓊脂,pH5.4-5.8;光照條件下培養時光照強度為1800-2000lx,光照時
間14-16h/d;
繼代增殖培養具體為:將初代培養的外植體的無菌組織莖段切下
接種到繼代培養基中,進行不定芽的繼代增殖培養;培養條件為:暗
培養1-3d后,在光照條件下培養25-30d;培養溫度為26±1℃;所述
繼代培養基為:MS+2-4mg/L6-BA+0.05-0.2mg/L?IBA+30g/L蔗糖
+7-10g/L瓊脂,pH5.4-5.8;光照條件下培養時光照強度為1800-2000lx,
光照時間14-16h/d;
生根培養具體為:繼代增殖培養后,取長至2-3cm的無菌苗進行
生根培養,將無菌苗插入生根培養基中進行培養,培養溫度為26±1
℃;先進行暗培養5-7d,然后在光照條件下培養至生根,光照強度為
1800-2000lx,光照時間14-16h/d;所述生根培養基的制備方法為:按
照1/2MS+0.5mg/L?IBA配制瓊脂培養基,其中瓊脂為7g/L,pH值5.5,
用網兜包好粉碎的過16目篩的珍珠巖,放入融化的培養基中,待珍珠
巖充分吸收培養基后,稍瀝干,滅菌,即得;
生根培養12-16d后,將無菌苗轉移到泥炭土、珍珠巖和油茶專用
肥按6:3:1的體積比混合的基質中,覆蓋薄膜,保持濕度80%以上,溫
度27-28℃,12-18d后移栽至常溫大棚或圃地中。
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