本發(fā)明涉及一種黃山欒樹的組培方法，包括如下步驟，(1)黃山欒樹葉提取液的制備；(2)初代誘導(dǎo)培養(yǎng)：將黃山欒樹莖段外植體接種于初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加有黃山欒樹葉提取液；(3)繼代增殖培養(yǎng)：將初代誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的黃山欒樹無菌苗的莖段或莖尖無菌接種于繼代增殖培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，繼代增殖培養(yǎng)基中添加有黃山欒樹葉提取液；(4)組培苗生根：將增殖培養(yǎng)獲得的黃山欒樹無菌叢生苗切成單株接種于生根培養(yǎng)基上，生根培養(yǎng)基中添加有黃山欒樹葉提取液；(5)試管苗的馴化和移栽。采用本方案可縮短周期時長15％，節(jié)約成本20％，適用于工廠化生產(chǎn)。

1.一種黃山欒樹的組培方法，其特征在于：包括如下步驟，
(1)黃山欒樹葉提取液的制備
將新鮮黃山欒樹葉切割成小塊后在蒸餾水中煮沸，冷卻、過濾后
配成質(zhì)量濃度為10％的提取液；
(2)初代誘導(dǎo)培養(yǎng)
初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基為3/4WPM+6-BA0.5～1.0mg/L+NAA0.05～0.08
mg/L+2～3％提取液+白糖20g/L+瓊脂5～8g/L，pH5.8；其中，2～3％
提取液指的是質(zhì)量濃度，由步驟(1)中質(zhì)量濃度為10％的提取液稀
釋而成；
從健壯黃山欒樹植株上獲取黃山欒樹莖段外植體，外植體經(jīng)常規(guī)
消毒后接種于初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基上；培養(yǎng)溫度為25±2℃，光照強度為
1500～2000Lx，光暗周期比為12h:12h；
(3)繼代增殖培養(yǎng)
繼代增殖培養(yǎng)基為：3/4WPM+6-BA0.3～0.8mg/L+NAA0.03～0.05
mg/L+2～3％提取液+白糖20g/L+瓊脂5～8g/L，pH5.8；其中，2～3％
提取液指的是質(zhì)量濃度，由步驟(1)中質(zhì)量濃度為10％的提取液稀
釋而成；
將初代誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的黃山欒樹無菌苗的莖段或莖尖無菌接種
于繼代增殖培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25±2℃，光照強度為
1500～2000Lx，光暗周期比為12h:12h；
(4)組培苗生根
生根培養(yǎng)基為：2/5WPM+IBA0.1～0.3mg/L+1～2％提取液+白糖20
g/L+瓊脂5～8g/L，pH5.8；其中，1～2％提取液指的是質(zhì)量濃度，由
步驟(1)中質(zhì)量濃度為10％的提取液稀釋而成；
將增殖培養(yǎng)獲得的黃山欒樹無菌叢生苗切成單株接種于生根培
養(yǎng)基上，培養(yǎng)溫度為25±2℃，光照強度為1500～2000Lx，光暗周期
比為12h:12h；
(5)試管苗的馴化和移栽
將黃山欒樹生根試管苗從培養(yǎng)室移至塑料大棚放置5～7d后，去
瓶蓋煉苗3～5d，然后從瓶內(nèi)取出黃山欒樹幼苗，用水輕輕洗凈培養(yǎng)
基，將待栽的黃山欒樹幼苗根部用0.1％多菌靈處理10s后，將幼苗
移栽入穴盤中的栽培基質(zhì)內(nèi)，覆膜保濕5～7d，其間每天通風透氣
10～15min兩次，視光照強度適當加蓋遮陽網(wǎng)，一周后完全揭除塑料
薄膜小拱棚，噴施1000倍液的甲基托布津，此后進行正常的栽培管
理。