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一種花生體胚誘導(dǎo)及植株再生的方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2022-01-31
  • 技術(shù)成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201010534472.7 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種花生體胚誘導(dǎo)及植株再生的方法 
  • 項目單位 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
  • 發(fā)明人 王晶珊,趙明霞,隋炯明,喬利仙,蓋樹鵬,郭寶太,王曉杰 
  • 行業(yè)類別 中藥材獲取-植物藥材種植
  • 技術(shù)成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 錢淑英
  • 發(fā)布時間 2022-01-31  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明提供一種花生體胚誘導(dǎo)及植株再生的方法,可以解決現(xiàn)有技術(shù)存在的植株再生頻率低的問題。主要步驟是將表面消毒并浸泡好的花生種胚分離胚小葉,接種到添加5~10mg/L2,4-D的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)形成體胚,然后轉(zhuǎn)移到添加了4mg/LBAP的體胚萌發(fā)培養(yǎng)基上,繼代兩次后得再生苗;當(dāng)體胚萌發(fā)伸長后從基部切下,轉(zhuǎn)移至添加0.2~0.5mg/LNAA的1/2MS無機鹽+B5有機的生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根得完整植株。通過以花生成熟種子胚小葉為外植體,在5~10mg/L2,4-D的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上及4mg/L BAP的體胚萌發(fā)培養(yǎng)基上,體胚誘導(dǎo)率及植株再生率高,同時體細胞胚起源于一個細胞,避免了再生植株的嵌合性。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種花生體胚誘導(dǎo)及植株再生的方法,其特征在于包括如下步驟,
    (1)制備體胚誘導(dǎo)培養(yǎng)基:選取MSB5為基本培養(yǎng)基,在所述基本培養(yǎng)基
    中添加2,4-D制成體胚誘導(dǎo)培養(yǎng)基,2,4-D的添加量為每升所述基本培養(yǎng)基中
    添加5~10mg,所述MSB5為MS無機鹽+B5有機成分所組成的培養(yǎng)基;
    (2)選擇外植體材料:將花生種子去子葉后的種胚表面消毒,取胚小葉
    為外植體材料;
    (3)按以下步驟進行體胚誘導(dǎo)及植株再生:
    a將花生種子去子葉后的種胚進行表面消毒,然后用無菌水漂洗后,置于
    裝有無菌水的廣口瓶中浸泡12~16h;
    b取出經(jīng)表面消毒浸泡好的種胚,置于無菌培養(yǎng)皿中分離種胚的胚小葉,
    接種到所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行誘導(dǎo)培養(yǎng),25~30d后形成體胚;
    c將形成有體胚的外植體轉(zhuǎn)移至體胚萌發(fā)培養(yǎng)基上進行萌發(fā)培養(yǎng),每隔
    25~30d繼代一次,繼代兩次后得到再生苗;所述體胚萌發(fā)培養(yǎng)基是由選取MSB5
    為基本培養(yǎng)基,在所述基本培養(yǎng)基中添加BAP形成,BAP的添加量為每升所述
    基本培養(yǎng)基中添加4mg;
    d當(dāng)再生苗生長至2~3cm時,從基部切下,轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根,
    獲得完整植株;所述生根培養(yǎng)基是由選取1/2MSB5為基本培養(yǎng)基,在所述1/2MSB5
    基本培養(yǎng)基中添加NAA形成,NAA的添加量為每升所述基本培養(yǎng)基中添加0.2~
    0.5mg。
    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的花生體胚誘導(dǎo)及植株再生的方法,其特征在于,
    所述培養(yǎng)基均在培養(yǎng)室溫度為24~26℃、光照強度為2500~3500Lx、光照時間
    為13h/d的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)。
    3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的花生體胚誘導(dǎo)及植株再生的方法,其特征在于,
    所述花生種子去子葉后的種胚進行表面消毒是采用75%的酒精浸泡15~25s,再
    用0.1%的升汞浸泡。
    展開

專利技術(shù)附圖

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