本發明涉及用于在工業規模上生產用于疫苗目的b型流感嗜血桿菌的莢膜多糖(PRP)的方法，根據所述方法，將b型流感嗜血桿菌(Hib)的菌株在培養基中培養，收獲該培養上清液，處理該培養上清液以便從其提取莢膜多糖，所述培養基包含至少：–一種碳源，–原卟啉，–鹽，–氨基酸，–NAD或NADH，–維生素，–pH調節手段，其特征在于所述培養基是在化學上確定的。

1.用于在工業規模上生產用于疫苗目的的b型流感嗜血桿菌的莢膜多糖(PRP)的方法，
根據所述方法，將b型流感嗜血桿菌(Hib)的菌株在培養基中培養，收獲該培養上清液，處理
該培養上清液以便從其提取莢膜多糖，所述培養基包含至少：
– 一種碳源，
– 原卟啉，
– 鹽，
– 氨基酸，
– NAD或NADH，
– 維生素，
– pH調節手段，和
– 鋅，
其特征在于所述培養基中的每種成分的化學結構和量是完全確定的，且鋅的濃度對應
于2.5 - 80 mg/L ZnSO₄.7H₂O。
2.根據權利要求1的方法，其特征在于所述培養基包含尿嘧啶或次黃嘌呤。
3.根據權利要求1的方法，其特征在于所述碳源包含以下至少一種：葡萄糖、果糖、半乳
糖、甘油、木糖、核糖、巖藻糖、唾液酸和乳酸鹽。
4.根據權利要求1的方法，其特征在于所述pH調節手段由緩沖鹽組成。
5.根據權利要求1的方法，其特征在于所述原卟啉是合成的原卟啉IX。
6.根據權利要求1的方法，其特征在于所述鹽選自鉀鹽、鎂鹽、鈉鹽、鈣鹽、鐵鹽、鋅鹽、
鈷鹽和錳鹽。
7.根據權利要求1或6的方法，其特征在于所述鹽選自：K₂HPO₄；KH₂PO₄；MgSO₄.7H₂O；
Na₂HPO₄.12H₂O；NaH₂PO₄.2H₂O；CaCl₂.2H₂O；FeSO₄.7H₂O；ZnSO₄.7H₂O；CoCl₂. 6H₂O；MnSO₄.H₂O。
8.根據權利要求1的方法，其特征在于所述氨基酸選自以下一種或多種：
精氨酸、丙氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、賴氨酸、組氨酸、色氨酸、纈氨
酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、胱氨酸或等效物。
9.根據權利要求1的方法，其特征在于所述培養基至少包含精氨酸、丙氨酸、組氨酸、色
氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、胱氨酸、天冬氨酸和谷氨酸。
10.根據權利要求8或9的方法，其特征在于用谷胱甘肽或半胱氨酸替代胱氨酸。
11.根據權利要求1或2的方法，其特征在于所述維生素選自：硫胺素、泛酸鹽、生物素、
核黃素和吡哆醇。
12.根據權利要求2的方法，其特征在于用瓜氨酸替代尿嘧啶。
13.根據權利要求8或9的方法，其特征在于用瓜氨酸替代精氨酸。
14.根據權利要求1或2的方法，其特征在于其還包括將獲得的莢膜多糖綴合至載體蛋
白的步驟。
15.根據權利要求14的方法，其特征在于所述載體蛋白是破傷風類毒素。
16.用于制備疫苗組合物的方法，所述方法包含根據權利要求1-13中任一項權利要求
的方法制備莢膜多糖的步驟。
17.根據權利要求16的方法，其特征在于其還包括將獲得的莢膜多糖綴合至載體蛋白
的步驟。
18.根據權利要求17的方法，其特征在于所述載體蛋白是破傷風類毒素。
19.根據權利要求17或18的方法，其特征在于其然后包含將獲得的綴合物與用于針對
選自以下的一種或多種感染的進行疫苗接種的至少一種或多種抗原組合的步驟：白喉、破
傷風、脊髓灰質炎、乙型肝炎、水痘、腮腺炎、風疹、由腦膜炎奈瑟氏菌或肺炎鏈球菌引起的
感染、和由輪狀病毒引起的感染，以便獲得允許針對數種疾病同時免疫的疫苗組合。
20.根據權利要求17或18的方法，其特征在于其然后包含將獲得的綴合物與白喉、破傷
風和乙型肝炎抗原組合的步驟。
21.根據權利要求17或18的方法，其特征在于其然后包含將獲得的綴合物與白喉類毒
素、破傷風類毒素和2種無細胞百日咳博代氏桿菌抗原組合的步驟，所述2種無細胞百日咳
博代氏桿菌抗原為類毒素和絲狀血凝素。
22.根據權利要求17或18的方法，其特征在于其然后包含將獲得的綴合物與白喉類毒
素、破傷風類毒素和3種無細胞百日咳博代氏桿菌抗原組合的步驟，所述3種無細胞百日咳
博代氏桿菌抗原為類毒素、百日咳桿菌粘附素和絲狀血凝素。
23.根據權利要求17或18的方法，其特征在于其然后包含將獲得的綴合物與白喉類毒
素、破傷風類毒素和5種無細胞百日咳博代氏桿菌抗原組合的步驟，所述5種無細胞百日咳
博代氏桿菌抗原為類毒素、百日咳桿菌粘附素、凝集原類和絲狀血凝素。
24.根據權利要求17或18的方法，其特征在于其然后包含將獲得的綴合物與白喉類毒
素、破傷風類毒素、數目為2、3或5種的無細胞百日咳博代氏桿菌抗原以及滅活的1、2和3型
脊髓灰質炎病毒組合的步驟。
25.根據權利要求17或18的方法，其特征在于其然后包含將獲得的綴合物與白喉類毒
素、破傷風類毒素、乙型肝炎抗原、數目為2、3或5種的無細胞百日咳博代氏桿菌抗原以及滅
活的1、2和3型脊髓灰質炎病毒組合的步驟。
26.根據權利要求17或18的方法，其特征在于其然后包含將獲得的綴合物與完整百日
咳博代氏桿菌細菌組合的步驟。