本發(fā)明涉及一種杏梅組織培養(yǎng)快速繁殖方法，包括：以當(dāng)年生杏梅種子為外植體，經(jīng)消毒、冷藏、啟動培養(yǎng)后，將無菌苗子葉和/或嫩莖接種在分化培養(yǎng)基上，培養(yǎng)3?4周；獲得不定芽后，將不定芽轉(zhuǎn)移至抽莖培養(yǎng)基上，繼續(xù)培養(yǎng)2?3周；待叢生苗長至3?4cm長時，將叢生苗轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)2?3周；然后將生根苗移栽、罩煉苗后，正常培養(yǎng)。本發(fā)明不定芽誘導(dǎo)數(shù)量達(dá)10.6，叢生苗莖高達(dá)3.56cm，叢生苗增值系數(shù)達(dá)5.5，生根率達(dá)95％。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了杏梅組培快繁，為梅花遺傳轉(zhuǎn)化及分子育種提供了技術(shù)支持。

1.一種杏梅組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，包括：以當(dāng)年生杏梅種子為外植體，
經(jīng)消毒、冷藏、啟動培養(yǎng)后，將無菌苗子葉和/或嫩莖接種在分化培養(yǎng)基上，培養(yǎng)3-4周；獲得
不定芽后，將不定芽轉(zhuǎn)移至抽莖培養(yǎng)基上，繼續(xù)培養(yǎng)2-3周；待叢生苗長至3-4cm長時，將叢
生苗轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)2-3周；然后將生根苗移栽、煉苗后，正常培養(yǎng)；
種子冷藏處理方法包括：將消毒后的種子轉(zhuǎn)接入冷藏培養(yǎng)基中，一個組培容器中放置
6-7枚，種子與種子之間間隔1-2cm，并用封口膜封口；將組培容器放置于4℃冰箱黑暗處理
培養(yǎng)3-4周；啟動培養(yǎng)方法包括：將冷藏處理后的種子轉(zhuǎn)移至新鮮的啟動培養(yǎng)基中，在組織
培養(yǎng)室中培養(yǎng)2-3周，直到種子萌發(fā)；培養(yǎng)環(huán)境如下：溫度23±2℃，16h光照/8h黑暗，光照強(qiáng)
度2500lux-3000lux；
所用冷藏培養(yǎng)基為：1/2 MS培養(yǎng)基+蔗糖10-20g/L+瓊脂適量，pH值5.8-6.0；
所用啟動培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基+蔗糖20-25g/L+6-BA 0.10-0.30mg/L+NAA 0.05-
0.25mg/L+瓊脂適量，pH值5.8-6.0；
所述分化培養(yǎng)基為：QL培養(yǎng)基+蔗糖20-30g/L+6-BA 0.25-0.50mg/L+NAA 0.05-
0.10mg/L+IBA 0.05-0.10mg/L+瓊脂適量，pH值5.8-6.0；
所述抽莖培養(yǎng)基為：QL培養(yǎng)基+蔗糖20-25g/L+6-BA 0.10-0.20mg/L+NAA 0.05-
0.10mg/L+瓊脂適量，pH值5.8-6.0；
所述生根培養(yǎng)基為：1/2MS培養(yǎng)基+蔗糖20-25g/L+IBA 0.15-0.30mg/L+瓊脂適量，pH值
5.8-6.0。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，對所述外植體進(jìn)行消毒的步驟：選用完整
杏梅種子為外植體，室內(nèi)流水沖洗30min后，在無菌條件下，利用含0.03％Tween-20的2％次
氯酸鈉消毒30min，再利用無菌水清洗3-4遍，鋪于無菌濾紙上晾干。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所用移栽、煉苗方法包括將獲得的生根
苗，移栽至含10％珍珠巖的草炭土基質(zhì)中，罩瓶煉苗1周后，正常培養(yǎng)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述移栽與煉苗方法包括：生根培養(yǎng)2-3周
后，將生根苗移栽至含10％珍珠巖的草炭土基質(zhì)中，將組培瓶倒扣至移栽苗上，罩瓶培養(yǎng)1
周后，保持空氣濕度為60％-70％，去瓶正常培養(yǎng)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-2、4任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所用冷藏培養(yǎng)基為：1/2MS培養(yǎng)
基+蔗糖10g/L+瓊脂適量，pH值5.8-6.0；和/或，
所用啟動培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基+蔗糖25g/L+6-BA0.25mg/L+NAA 0.05mg/L+瓊脂5.8g/L，
pH值5.8-6.0；和/或，
所述分化培養(yǎng)基為：QL培養(yǎng)基+蔗糖25g/L+6-BA 0.50mg/L+NAA 0.10mg/L+IBA
0.05mg/L+瓊脂適量，pH值5.8-6.0；和/或，
所述抽莖培養(yǎng)基為：QL培養(yǎng)基+蔗糖25g/L+6-BA 0.20mg/L+NAA 0.10mg/L+瓊脂適量，
pH值5.8-6.0；和/或，
所述生根培養(yǎng)基為：1/2MS培養(yǎng)基+蔗糖20g/L+IBA 0.30mg/L+瓊脂適量，pH值5.8-6.0。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-2、4任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)種子消毒處理：每年6-7月，收集杏梅成熟果實(shí)，利用夾核器破碎果核，收集完整種
子；利用流水沖洗30min后，在超凈工作臺中，利用含0.03％Tween-20的2％次氯酸鈉消毒
30min，轉(zhuǎn)移消毒后的種子至無菌水中清洗3-4遍；
(2)種子冷藏處理：將步驟(1)中消毒后的種子轉(zhuǎn)接入冷藏培養(yǎng)基中，一個組培容器中
放置6-7枚，種子與種子之間間隔1-2cm，并用封口膜封口；將組培容器放置于4℃冰箱黑暗
處理培養(yǎng)3-4周；
(3)啟動培養(yǎng)：將步驟(2)中冷藏處理后的種子轉(zhuǎn)移至新鮮的啟動培養(yǎng)基中，在組織培
養(yǎng)室中培養(yǎng)2-3周，直到種子萌發(fā)；培養(yǎng)環(huán)境如下：溫度23±2℃，16h光照/8h黑暗，光照強(qiáng)度
2500lux-3000lux；
(4)分化培養(yǎng)：將步驟(3)中萌發(fā)的無菌苗的上部子葉和/或嫩莖接種至分化培養(yǎng)基上，
誘導(dǎo)形成不定芽；
(5)抽莖培養(yǎng)：將步驟(4)中形成的不定芽團(tuán)剪切后，接種于抽莖培養(yǎng)基，進(jìn)行叢生抽莖
培養(yǎng)；
(6)生根培養(yǎng)：將步驟(5)中形成的叢生芽，剪切接種至生根培養(yǎng)基中，進(jìn)行生根培養(yǎng)；
(7)移栽與煉苗：將步驟(6)中獲得的生根苗，移栽至含10％珍珠巖的草炭土基質(zhì)中，罩
瓶煉苗1周后，正常培養(yǎng)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-2、4任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所用杏梅種子來源于杏梅品種
‘淡豐后’自交授粉所結(jié)果實(shí)。