1.一種五指毛桃組織培養快速繁殖方法,其特征在于:該方法包括以下步驟:
(1)外植體的選擇與消毒:取五指毛桃葉片作為外植體,依次用5%洗潔精水溶液浸泡
5-10min、線狀自來水沖洗10-15min、添加了2-3滴吐溫-20的100毫升0.1%升汞消毒
8-10min、無菌水沖洗3-5次,最后用消毒濾紙吸去表面水分,得到消毒后的外植體,所述
無菌水為經高壓滅菌的蒸餾水,
(2)葉片分化獲得叢生芽誘導培養:將步驟(1)得到消毒后的外植體接種到MS培養
基中,在培養溫度為23-26℃,光照強度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件
下培養30天,葉片分化后獲得叢生芽,其中MS培養基中添加0.5-1.5mg/L的6-BA、
0.1-0.5mg/L的NAA、0.1-0.5mg/L的2,4-D、25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養基
的pH值為5.8,
(3)叢生芽繁殖培養:將步驟(2)中得到的叢生芽置于MS繁殖培養基中,在培養溫
度23-26℃,光照強度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件下培養40天得到
健壯植株,其中MS繁殖培養基中添加0.1-0.5mg/L的IAA、0.1-0.5mg/L的KT、25-30g/L
蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養基的pH值為5.8,
(4)無菌苗生根培養:將步驟(3)中得到的叢生芽切成單芽置于1/2MS生根培養基中,
在培養溫度23-26℃,光照強度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件下培養40
天得到帶根的完整植株,其中1/2MS生根培養基中添加0.5-1.5mg/L的IBA、0.1-0.5mg/L
的NAA、25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養基的pH值為5.8,
(5)煉苗與移栽:步驟(4)獲得帶根的完整植株后,在室溫為25℃的室內打開瓶蓋,
在瓶中加入少量自來水,煉苗2-4天,表面角質形成后將苗取出,洗凈根部培養基,立即移
栽到按質量比為泥炭土:珍珠巖=1:1的基質中,在該基質中生長一個月后移栽大田。
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