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一種人參高效組織培養和再生的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-03
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201210165221.5 
  • 技術(專利)名稱 一種人參高效組織培養和再生的方法 
  • 項目單位 東北師范大學
  • 發明人 龐勁松,劉寶,劉曉東,賀紅利,李樹珍 
  • 行業類別 中藥材獲取-植物藥材種植
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 朱珍儀
  • 發布時間 2022-01-03  
  • 01

    項目簡介

    本發明為生物技術,特別是涉及一種使人參經過長時間多次繼代培養后仍能保持分化再生能力技術的方法。是以人參的特定組織為外植體,其中特別以莖節為外植體產生的愈傷組織效率最高,在經過優化的以MS培養基為主的培養體系中,經過誘導產生愈傷組織,這種愈傷組織可以在繼代培養基上長期旺盛生長,繼代。這種愈傷組織大量產生可供制藥使用的多種人參次生代謝產物——人參皂甙、甾醇、多糖等。而且經過長期繼代培養之后的愈傷組織,在轉換培養條件為再生培養基時,仍能保持高效率的芽和根再生能力,并產生大量完整再生植株,可以在到土壤中繼續栽種。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種人參高效組織培養和再生的方法,其特征是具體步驟如下:1)?愈傷組織的誘導及繼代:取人參的莖節,在超凈臺中用鋒利刀片切成3-5毫米大小的組織塊,放入三角瓶中,用70%酒精浸泡、0.1%升汞滅菌,然后用無菌蒸餾水徹底漂洗5-6遍,將組織塊轉移到盛有愈傷組織誘導培養基的三角瓶中,置于25℃培養箱中暗培養,每3周進行一次繼代培養,在超凈臺中生長旺盛的愈傷組織從原瓶中轉移到有新鮮繼代培養基的三角瓶中,然后繼續25℃暗培養,所用的愈傷組織誘導培養基為:MS基本培養基+CH?5-500mg/L?+?2,4-D?0.1-20mg/L?+?6-BA?0.1-5mg/L+?NAA?0.1-5mg/L,?所用的繼代培養基為:MS基本培養基??+?CH?5-500mg/L?+?2,4-D?0.1-10mg/L?+?6-BA?0.1-5mg/L?+?NAA?0.1-5mg/L?+?KT?0.1-1mg/L;2)?植株再生:在愈傷組織繼代培養2次之后,取愈傷組織進行分化,在超凈臺中將愈傷組織塊從繼代培養基上取出,轉移到含有分化培養基即芽再生培養基的三角瓶中,在培養箱中25℃光培養,即光周期16小時光照+8小時黑暗,光照強度為3000Lux,10天以后,可見愈傷組織部分突起處出現綠色芽點,2-3周后變成幼芽,將幼芽在無菌條件下轉移到含有生根培養基的三角瓶中,繼續光培養,?7天后可見幼苗的基部與培養基交接處出現根組織,再過約30天的生根培養,即可長成根長度1厘米以上的完整再生植株,分化培養基為:1/4MS基本培養基?+?CH?5-500mg/L??+?NAA?0.5-10mg/L?+?6-BA?0.1-5mg/L?+?KT?0.1-1mg/L;?????所述MS基本培養基成分為:大量元素使用濃度 (mg/L)硝酸鉀 KNO31900硝酸銨 NH4NO31650磷酸二氫鉀 KH2PO4170硫酸鎂 MgSO4·7H2O370氯化鈣 CaCl2·2H2O440微量元素?碘化鉀 KI0.83硼酸 H3BO36.2硫酸錳 MnSO4·4H2O22.3硫酸鋅 ZnSO4·7H2O8.6鉬酸鈉 Na2MoO4·2H2O0.25硫酸銅 CuSO4·5H2O0.025氯化鈷 CoCl2·6H2O0.025鐵鹽?乙二胺四乙酸二鈉 Na2·EDTA37.25硫酸亞鐵 FeSO4·7H2O27.85有機成分?肌醇100甘氨酸2鹽酸硫胺素 VB10.1鹽酸吡哆醇 VB60.5煙酸 VB5 或 VPP0.5蔗糖 sucrose30g/L瓊脂 agar8g/L
    ?3)?煉苗及移栽:打開三角瓶的封口膜,將三角瓶連同里面的幼苗在培養箱中放置3天,然后將它們放入即將栽種幼苗的溫室中3天煉苗,將幼苗完整地從培養基中取出,小心地除去附著在上面的愈傷組織和培養基碎塊,并用蒸餾水反復沖洗干凈,然后將幼苗栽入滅菌營養土中,保持環境濕度和潔凈度,2-3周后幼苗即可成活。
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專利技術附圖

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