本發明涉及一種利用擴張蛋白提高靈芝菌絲體中總黃酮產量的方法，包括如下步驟：(1)將靈芝菌種接種到PD液體發酵培養基中，進行活化培養，得種子液；(2)將種子液接種于液體發酵培養基中，液體發酵培養3～5天，然后加入擴張蛋白溶液，然后繼續培養5～7天，分離，得到靈芝菌絲體；(3)從靈芝菌絲體中提取黃酮類成分，得到總黃酮。本發明將植物擴張蛋白用于靈芝黃酮類成分的液體發酵生產，且優化了發酵工藝和提取方法，大幅度提高靈芝中總黃酮的產量，使每升發酵液產量達到760.1mg，具有很好的工業化應用前景。

1.一種提高靈芝菌絲體中總黃酮產量的方法，其特征在于，包括如下步驟：（1）將靈芝菌種接種到PD液體發酵培養基中，進行活化培養，得種子液；（2）將步驟（1）制得種子液按5～10?%體積比接種于液體發酵培養基中，在溫度25～30?℃的條件下，液體發酵培養3～5天，然后加入擴張蛋白溶液，使擴張蛋白的濃度為0.5～2.0?mg/mL，然后繼續培養5～7天，分離，得到靈芝菌絲體；（3）從步驟（2）制得的靈芝菌絲體中提取黃酮類成分，得到總黃酮；所述步驟（2）中的液體發酵培養基，每升組分如下：乳糖20?g，蔗糖20?g，黃豆粉25?g，蛋白胨2?g，酵母浸膏1?g，MgSO₄·7H₂O?0.5?g，?KH₂PO₄?0.5?g，水定容至1000?mL，pH?6.0；所述步驟（2）中的擴張蛋白溶液制備方法如下：將大豆或黃瓜種子經0.05～0.15?wt%?HgCl₂消毒4～6?min，流水沖洗5～7?h，然后，25～28?℃暗培養4～6天；剪取幼苗下胚軸頂端3～4?cm，置-20?℃預冷0.5?h，加預冷至4?℃的勻漿緩沖液，勻漿后，用孔徑70?μm的尼龍網過濾，濾渣經勻漿緩沖液洗滌，然后將濾渣加入勻漿緩沖液中，室溫靜置1～3?h，得靜置液；向靜置液中加入提取液，4?℃下提取44～50?h，過濾，按0.3～0.5?g/mL的添加量向濾液中緩慢添加（NH₄）₂SO₄，添加（NH₄）₂SO₄過程中不斷攪拌，防止（NH₄）₂SO₄局部過飽和，然后靜置45～50?h，?4?℃條件下25000?g離心5～10?min，沉淀用酸性緩沖液復溶，4?℃下分子量3000?Da的透析袋透析，透析液經20000?g離心10?min，取上清液即為制備的擴張蛋白溶液；上述擴張蛋白溶液制備方法中，所述勻漿緩沖液組分為：25?mmol/L?4-羥乙基哌嗪乙磺酸，1.5?mmol/L?Na₂S₂O₅，2?mmol/L?EDTA，0.1?wt%?Triton?X-100，pH?7.0；所述提取液組分為：15?mmol/L?4-羥乙基哌嗪乙磺酸，1.0?mmol/L?乙二胺四乙酸，1.5?mmol/L?Na₂S₂O₅，0.5?mol/L?NaCl，pH?6.0；所述酸性緩沖液配制是：將2.05?g醋酸鈉溶于水中，用冰醋酸調節pH至4.0，水定容至1?L。2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（1）中的活化培養條件為：搖床轉速100～180?r/min，溫度25～30℃，暗培養活化3～5天。3.?如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（2）中，擴張蛋白的濃度為0.75～1.75mg/mL。4.?如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟（2）中，擴張蛋白的濃度為1.5?mg/mL。5.?如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中所述的分離方法為：4?℃?15000?r/min條件下離心分離10?min。6.?如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中靈芝菌絲體中提取黃酮類成分的方法按如下步驟如下：將步驟（2）制得的靈芝菌絲體65?℃烘干，研成粉末，加入70～80?%乙醇，60～70?℃、40?kHz功率200?W條件下，超聲提取3～5?h，過濾，取濾液，濾渣重復上述超聲提取、過濾步驟2～3次，合并濾液，即得黃酮類成分。