1.一種紅樹莓的組織培養與快速繁殖方法,其特征在于包括下列工藝
步驟:
A、將經過消毒滅菌處理過的紅樹莓外植體——即紅樹莓的莖尖或帶芽
莖段,接種到下列誘導培養基中:
MS培養基
糖??????????????30~40g/L
瓊脂????????????5~7g/L
BA??????????????0.5~1.5mg/L
NAA?????????????0.1~0.3mg/L
pH??????????????5.8~6.0
在光照強度為1500~2000lx,溫度為20~27℃,光周期為8~10h/d
培養條件下,培養至外植體萌發葉分化成芽叢,切下芽叢,而外植體繼續
在誘導培養基中,反復誘導培養至長出新芽叢,以25~35天為周期轉接繼
代一次;
B、將A步驟切下的芽叢依次轉接至下列增殖培養基I和II中:
增殖培養基I:
MS培養基
糖??????????????30~40g/L
瓊脂????????????5~7g/L
BA??????????????0.5~1.0mg/L
NAA?????????????0.2~0.3mg/L
pH??????????????5.8~6.0
增殖培養基II:
MS培養基
糖??????????????30~40g/L
瓊脂????????????5~7g/L
BA??????????????1.0~1.5mg/L
NAA?????????????0.1~0.2mg/L
pH??????????????5.8~6.0
并在光照強度為1500~2000lx,溫度為20~27℃,光周期為8~10h/d
培養條件下,進行增殖培養,且在增殖培養基I和II中,分別每25~35天
繼代一次,得增殖倍數為2.5~3的芽叢,如此反復進行增殖培養至所需數
量的芽叢,并使芽叢長成2~3節、高2~3cm的芽苗,切下;
C、將B步驟切下的芽苗分成單株,接種到下列生根培養基中,在光照
強度為1500~2000lx,溫度為20~27℃,光周期為8~10h/d培養條件
下,生根培養至芽苗長大并生根:
1/2MS培養基
糖????????????30~40g/L
瓊脂??????????5~7g/L
IAA???????????0.1~0.2mg/L
NAA???????????0.3~0.5mg/L
pH????????????5.8~6.0;
D、將上述C步驟的生根苗移至室外散射光下鍛煉6~10天后,取出生
根苗,用清水將苗上培養基洗凈,放入質量濃度為0.1%的多菌靈溶液中消
毒1~2分鐘,移栽至裝有下列基質的育苗袋中:腐殖土∶紅土=1∶1質量比
的基質中,該基質中混合有質量比為4~7%的珍珠巖,即得紅樹莓種苗。
2.如權利要求1所述的紅樹莓的組織培養與快速繁殖方法,其特征在
于所述A步驟的對紅樹莓外植體進行消毒滅菌處理為:在無菌超凈臺中,
將經洗滌劑清洗過的2~3cm莖尖或帶芽莖段,依次在體積濃度為70%~75%
的酒精中消毒處理30~60秒、在質量濃度為0.1%~0.15%的HgCl2中滅菌處
理6~10分鐘、在體積濃度為1.5%~2%的次氯酸鈉溶液中消毒處理15~20
分鐘,之后用無菌水漂洗2~3次,即可。
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