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一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-09-15
  • 技術(shù)成熟度:可以量產(chǎn)
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

專利推薦

  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN200910047148.X 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法 
  • 項(xiàng)目單位 華東理工大學(xué)
  • 發(fā)明人 鮑杰,楚德強(qiáng),張建,畢德璽,朱培,蘆晨陽,范超 
  • 行業(yè)類別 藥品-化學(xué)藥品
  • 技術(shù)成熟度 可以量產(chǎn)
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 孫崠哲
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-09-15  
  • 01

    項(xiàng)目簡介

    本發(fā)明涉及一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法,其具體步驟為,(1)發(fā)酵菌種的活化:從菌種保藏平板、保藏斜面或冷凍甘油保藏管保存的菌種接種于合成培養(yǎng)基;(2)培養(yǎng)基中添加預(yù)處理的固體秸稈進(jìn)行同步糖化馴化培養(yǎng)種子;(3)種子液的多級擴(kuò)大培養(yǎng)過程;(4)接種與發(fā)酵:將步驟(2)或(3)培養(yǎng)獲得的含發(fā)酵菌種的漿液接種于高固含量的發(fā)酵罐進(jìn)行同步糖化發(fā)酵制備乙醇或其他生物基產(chǎn)品。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn):消除了固液分離獲得水解液清液過程中的染菌風(fēng)險(xiǎn),提高了菌株對抑制物和固體基質(zhì)的耐受性,過程成本降低,發(fā)酵周期縮短,具有很好的工業(yè)化應(yīng)用前景。
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  • 02

    說明書

    1.一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法,其特征在于,其具體步驟為:(1)發(fā)酵菌種的活化:從菌種保藏平板、保藏斜面或冷凍甘油保藏管保存的菌種接種于合成培養(yǎng)基,培養(yǎng)溫度25~45℃;轉(zhuǎn)速50~500rpm;培養(yǎng)12~36小時(shí),OD600值達(dá)到4~16;在合成培養(yǎng)基中,葡萄糖濃度10~100g/L,營養(yǎng)鹽濃度是KH2PO4或K2HPO4?0.5~10g/l,MgSO4·7H2O?0.1~5g/l,(NH4)2SO4?0.5~10g/l,酵母萃取粉或玉米漿0.1~10g/l;所述的菌種為釀酒酵母、管囊酵母、樹干畢赤酵母或者運(yùn)動發(fā)酵單胞菌菌株;OD600值是指含有菌體的溶液在600nm波長處的吸光值;(2)培養(yǎng)基中添加固體秸稈進(jìn)行同步糖化馴化培養(yǎng)種子:活化的種子液的體積百分?jǐn)?shù)為5~20%接種于固體秸稈的混合培養(yǎng)基中,在混合培養(yǎng)基中固體秸稈的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為3~30%,加入纖維素酶和營養(yǎng)鹽,轉(zhuǎn)速50~500rpm,溫度25~45℃,培養(yǎng)12~36小時(shí),得到發(fā)酵菌種的漿液;混合培養(yǎng)基是指以0.1~50g/L葡萄糖溶液調(diào)整固體秸稈固含量的培養(yǎng)基,其pH為2.0~8.0;所述的纖維素酶的加酶量為1~30FPU/g?DM,F(xiàn)PU指纖維素酶液中的纖維素酶濾紙酶活,DM是指秸稈類物質(zhì)干重;其中,纖維素酶液為商品化纖維素酶液;調(diào)整pH的溶液選自硫酸、氫氧化鈣溶液、氫氧化鈉溶液或者氨水中的一種或者兩種以上混合溶液;所述的營養(yǎng)鹽為KH2PO4或K2HPO4?0.5~10g/L,MgSO4·7H2O?0.1~?5g/L,(NH4)2SO4?0.5~10g/l,酵母萃取粉或玉米漿0.1~10g/L;所述的固體秸稈選自固體秸稈原料或者固體秸稈處理物;(3)種子液的多級擴(kuò)大培養(yǎng)過程:將步驟(2)獲得的種子液接種于含固體秸稈的培養(yǎng)基,在培養(yǎng)基中固體秸稈的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為3~30%,加入纖維素酶和營養(yǎng)鹽,在搖瓶或種子罐中擴(kuò)大培養(yǎng)種子,培養(yǎng)轉(zhuǎn)速100~500rpm,溫度25~45℃,培養(yǎng)12~36小時(shí),獲得種子培養(yǎng)液;種子液多級培養(yǎng)過程中培養(yǎng)級數(shù)涵蓋1級到6級,各培養(yǎng)級間接種量的體積百分比為5~20%,接種于發(fā)酵罐的種子液包括從1級到6級培養(yǎng)種子獲得的任一級的培養(yǎng)液,得到含發(fā)酵菌種的漿液。2.如權(quán)利要求1所述的一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法,其特征在于,在所述的步驟(1)中,菌種接種于合成培養(yǎng)基,培養(yǎng)溫度為30℃,轉(zhuǎn)速為150rpm。3.如權(quán)利要求1所述的一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法,其特征在于,在所述的步驟(1)中,所述的菌種為釀酒酵母。4.如權(quán)利要求1所述的一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法其特征在于,在所述的步驟(2)中,轉(zhuǎn)速為150rpm,溫度為37℃,培養(yǎng)為18小時(shí)。5.如權(quán)利要求1所述的一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法,其特征在于,在所述的步驟(2)中,混合培養(yǎng)基的pH為5.0。6.如權(quán)利要求1所述的一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法,其特征在于,在所述的步驟(2)中,所述的固體秸稈原料選自玉米秸稈、麥秸、稻草中的一種。7.如權(quán)利要求6所述的一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法,?其特征在于,所述的固體秸稈原料選自玉米秸稈。8.如權(quán)利要求1所述的一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法,其特征在于,在所述的步驟(2)中,所述的固體秸稈處理物選自采用稀酸、蒸汽爆破、氨氣爆破、生物法預(yù)處理后的玉米秸稈、麥秸、稻草中的一種。9.如權(quán)利要求8所述的一種以固體秸稈為碳源培養(yǎng)發(fā)酵種子液的方法,其特征在于,所述的固體秸稈處理物選自蒸汽汽爆預(yù)處理的玉米秸稈。?
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專利技術(shù)附圖

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