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一種大規模發酵鐵蛋白的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-10
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN202010760119.4 
  • 技術(專利)名稱 一種大規模發酵鐵蛋白的方法 
  • 項目單位 昆山新蘊達生物科技有限公司
  • 發明人 柯天一,姚德惠,勞芳,張澤譯,希倫,丁鳳姣,王曉飛 
  • 行業類別 藥品-化學藥品
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 秦明徹
  • 發布時間 2021-12-10  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及生物醫學工程技術領域,具體涉及一種大規模發酵鐵蛋白的方法。所述方法包括使用不含微量元素的發酵培養基,并優化了發酵條件。本發明的方法發酵效率高、成本低、制備的鐵蛋白載藥效果好、質量均一穩定。
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  • 02

    說明書

    1.一種發酵制備鐵蛋白的方法,其特征在于,包括如下步驟:(1)將包含如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的人HFn編碼基因的重組大腸桿菌的種子液接種于發酵培養基中進行培養;(2)發酵培養得到發酵液,其中發酵培養包括補料培養的步驟,所述補料培養是當所述發酵培養基中的碳源耗盡時進行補料,補料培養至OD600在30-60時停止補料,此為第一次補料,而后加入誘導劑,5-20分鐘后繼續補料至發酵結束,此為第二次補料;誘導10-20h后終止發酵,得到發酵液;所述第一次補料期內通過調控補料速率,維持菌體的比生長速率為0.08~0.16 h-1;所述第二次補料期內通過調控補料速率維持菌體的比生長速率為0.02~0.08 h-1;所述誘導劑為阿拉伯糖,所述阿拉伯糖的濃度為2-10g/L;(3)收集發酵液中的菌體;(4)破碎收集的菌體,離心,取上清液,即得;所述的發酵培養基由如下組分組成:酵母蛋白胨20g/L、酵母抽提物16g/L、氯化鈉1.2g/L、氯化銨1.2g/L、十二水合磷酸氫二鈉16g/L、磷酸二氫鉀2g/L、七水合硫酸鎂0.5g/L和葡萄糖16g/L;所述第一次補料和第二次補料的培養基配方如下:酵母提取物180g/L,葡萄糖520g/L,七水合硫酸鎂10g/L。2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(3)包括如下步驟:將所述發酵液在2-25℃以5000-12000 rpm離心15-30min,收集菌體;步驟(4)包括如下步驟:取所述收集的菌體用緩沖液重懸,裂解2-4次,離心,取上清液,即得。3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于,所述緩沖液為10-50mM Tris-HCl緩沖液,pH 7.5~8.5。
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專利技術附圖

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