本發(fā)明公開了一種2?甲基?L?色氨酸的酶法轉(zhuǎn)化制備方法，將具有色氨酸合成酶活性的菌株在培養(yǎng)基中培養(yǎng)發(fā)酵，發(fā)酵液離心后得到含色氨酸合成酶的濕菌體；將上述濕菌體中加入轉(zhuǎn)化液，所述轉(zhuǎn)換液中包括：含L?絲氨酸的料液，磷酸吡哆醛和2?甲基吲哚，乙醚、甲醇、乙醇、丙酮中的一種；在20～50℃，pH5～12條件下進(jìn)行酶促反應(yīng)，等電點(diǎn)結(jié)晶法分離得到2?甲基?L?色氨酸。本發(fā)明采用含色氨酸合成酶的特定菌株，在優(yōu)選的培養(yǎng)基中培養(yǎng)可以高效表達(dá)色氨酸合成酶，使酶法合成2?甲基?L?色氨酸有較高的催化速率和轉(zhuǎn)化率，L?絲氨酸摩爾轉(zhuǎn)化率達(dá)到98％以上，酶法合成反應(yīng)條件溫和，酶立體選擇性強(qiáng)，催化效率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

1.一種2-甲基-L-色氨酸的酶法轉(zhuǎn)化制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將具有色氨酸合成酶活性的菌株在培養(yǎng)基中培養(yǎng)發(fā)酵，發(fā)酵液離心后得到含色氨酸
合成酶的濕菌體；
(2)將上述濕菌體中加入轉(zhuǎn)化液，所述轉(zhuǎn)化液中包括：含L-絲氨酸的料液，磷酸吡哆
醛和2-甲基吲哚，乙醚、甲醇、乙醇、丙酮中的一種；在20～50℃，pH 5～12條件下進(jìn)行
酶促反應(yīng)，等電點(diǎn)結(jié)晶法分離得到2-甲基-L-色氨酸；
所述步驟(1)中，具有色氨酸合成酶活性的菌株選自大腸桿菌ATCC15489、銅綠假單胞
菌CGMCC NO：1.1129、施氏假單胞菌CGMCC NO:1.202、枯草芽孢桿菌CGMCC NO:1.1628中的
一種，所述含L-絲氨酸的料液來源于毛發(fā)酸水解液或純L-絲氨酸液；毛發(fā)酸水解液中總氨基
酸的重量百分比為5％～45％，其中L-絲氨酸在總氨基酸中的重量百分比為10％～90％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種2-甲基-L-色氨酸的酶法轉(zhuǎn)化制備方法，其特征在于，所
述步驟(1)中，培養(yǎng)基成分包括10～40g/L碳源物質(zhì)、5～35g/L氮源物質(zhì)、2.5g/L檸檬酸、
3.0g/L硫酸銨、6.0g/L K₂HPO₄、2.0g/L MgSO₄、0.05g/L CaCl₂、0.003g/L CoCl₂、0.0001g/L
MnC₄H₆O₄·4H₂O，碳源物質(zhì)采用葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、果糖中的一種或多種，氮源物質(zhì)采用牛
肉膏、酵母膏、玉米漿、蛋白胨、豆餅水解液中的一種或多種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種2-甲基-L-色氨酸的酶法轉(zhuǎn)化制備方法，其特征在于，所
述步驟(2)中，所述含L-絲氨酸的料液中L-絲氨酸的濃度為0.5～40.5g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種2-甲基-L-色氨酸的酶法轉(zhuǎn)化制備方法，其特征在于，所
述步驟(2)中，所述的乙醚、甲醇、乙醇或丙酮，其濃度為0.001g/L～4.0g/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種2-甲基-L-色氨酸的酶法轉(zhuǎn)化制備方法，其特征在于，所
述步驟(2)中，磷酸吡哆醛的濃度為0.2～0.8g/L，2-甲基吲哚的濃度為26.2～104.8g/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種2-甲基-L-色氨酸的酶法轉(zhuǎn)化制備方法，其特征在于，所
述步驟(2)中，等電點(diǎn)結(jié)晶法的具體方法如下：
將酶促反應(yīng)后的轉(zhuǎn)化液3000～5000r/min離心10～20min，去除菌體細(xì)胞；加熱轉(zhuǎn)化液，
采用活性炭脫色，抽濾，濾液調(diào)至pH 5～6，靜置析出沉淀，真空抽濾，烘干得2-甲基-L-
色氨酸粗品，采用乙醇洗滌，真空抽濾，烘干得2-甲基-L-色氨酸精品。